細胞培養(yǎng)初代消化培養(yǎng)法

1.細胞培養(yǎng)準備：取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺面，紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。

2.布局：點燃酒精燈，安裝吸管帽。

3.處理組織：把組織塊置于燒杯中，用Hanks液漂洗2~3次，去除血污；如懷疑組織可能污染，可先置于含有青*的混合液中30~60分鐘。

4.剪切：用眼科剪把組織切成2~3毫米大小的塊，以便于消化。加入比組織塊總量多30~50倍的*液，然后一并倒入三角燒瓶中，結(jié)扎瓶口或塞以膠塞。

5.消化：或用恒溫水浴，或置于37℃溫箱消化均可，消化中每隔20分鐘應搖動一次，如用電磁恒溫攪拌器消化更好。消化時間依組織塊的大小和組織的硬度而定。

6.分離：在消化過程中見消化液發(fā)混濁時，可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察，如組織已分散成細胞團或單個細胞，立即終止消化，隨即通過適宜不銹鋼篩，濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速（500~1000轉(zhuǎn)/分）離心消化液5分鐘，吸出上清，加入適量含有血清的培養(yǎng)液。

7.計數(shù)：用計數(shù)板計數(shù)，如細胞懸液細胞密度過大，再補加培養(yǎng)液調(diào)整后，分裝入培養(yǎng)瓶中。對大多數(shù)細胞來說，pH要求在7.2~7.4范圍，培養(yǎng)液呈微紅色，如顏色偏黃，說明液體變酸，可用NaHCO3調(diào)整。

8.細胞培養(yǎng)培養(yǎng)：置于36.5℃溫箱培養(yǎng)，如用CO2溫箱培養(yǎng)，瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞，紗布塞易生霉菌，每次換液時需要換新塞。
含量測定    含量：    進口/國產(chǎn)    D-木糖    20mg/支    英文名稱    111508-200404    規(guī)格:
含量測定    含量：    進口/國產(chǎn)    三十烷醇    20mg/支    英文名稱    111509-200302    規(guī)格:
含量測定    含量：    進口/國產(chǎn)    愈創(chuàng)木酚    20mg/支    英文名稱    111510-200202    規(guī)格:
含量測定    含量：    進口/國產(chǎn)    濱蒿內(nèi)酯    20mg/支    英文名稱    111511-200001    規(guī)格:
含量測定    含量：    進口/國產(chǎn)    異龍腦    20mg/支    英文名稱    111512-200201    規(guī)格:
鑒別    含量：    進口/國產(chǎn)    漢黃芩素    20mg/支    英文名稱    111514-200403    規(guī)格:
鑒別    含量：    進口/國產(chǎn)    甜菊苷    20mg/支    英文名稱    111515-200001    規(guī)格:
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