細(xì)胞培養(yǎng)方法之微量測(cè)序

細(xì)胞培養(yǎng)測(cè)序已成為蛋白質(zhì)分析和鑒定的基石，可以提供足夠的信息。 盡管氨基酸組分分析和肽質(zhì)指紋譜（PMF）可鑒定由2-DE分離的蛋白，但普通的N-末端Edman降解仍然是進(jìn)行鑒定的主要技術(shù)。 目前已實(shí)現(xiàn)蛋白質(zhì)微量測(cè)序的自動(dòng)化。 首先使經(jīng)凝膠分離的蛋白質(zhì)直接印跡在PVDF膜或玻璃纖維膜上，染色、切割，然后直接置于測(cè)序儀中，可用于subpicomole水平的蛋白質(zhì)的鑒定。 但有幾點(diǎn)需注意：Edman降解很緩慢，序列以每40 min 1個(gè)氨基酸的速率產(chǎn)生；與質(zhì)譜相比，Edman降解消耗大；試劑昂貴，每個(gè)氨基酸花費(fèi)3～4$。 這都說(shuō)明泛化的Edman降解蛋白質(zhì)不適合分析成百上千的蛋白質(zhì)。 然而，如果在一個(gè)凝膠上僅有幾個(gè)有意義的蛋白質(zhì)，或者如果其他技術(shù)無(wú)法測(cè)定而克隆其基因是必需的，則需要進(jìn)行泛化的Edman降解測(cè)序。
近來(lái)，應(yīng)用自動(dòng)化的Edman降解可產(chǎn)生短的N-末端序列標(biāo)簽，這是將質(zhì)譜的序列標(biāo)簽概念用于Edman降解，業(yè)已成為一種強(qiáng)有力的蛋白質(zhì)鑒定。 當(dāng)細(xì)胞培養(yǎng)對(duì)Edman的硬件進(jìn)行簡(jiǎn)單改進(jìn)，以迅速產(chǎn)生N-末端序列標(biāo)簽達(dá)10～20個(gè)/d，序列檢簽將適于在較小的蛋白質(zhì)組中進(jìn)行鑒定。若聯(lián)合其他的蛋白質(zhì)屬性，如氨基酸組分分析、肽質(zhì)質(zhì)量、表現(xiàn)蛋白質(zhì)分子量、等電點(diǎn)，可以更加可信地鑒定蛋白質(zhì)。 選擇BLAST程序，可與數(shù)據(jù)庫(kù)相配比。 目前，采用一種Tagldent的檢索程序，還可以進(jìn)行種間比較鑒定，又提高了其在蛋白質(zhì)組研究中的作用。
Cefepime Hydrochloride    *標(biāo)準(zhǔn)品    123171-59-5    500mg
    苯氧基乙醇標(biāo)準(zhǔn)品    122-99-6     500mg
Doxepin Hydrochloride    鹽酸*標(biāo)準(zhǔn)品    1229-29-4    500mg
Benzethonium Chloride    芐索氯銨標(biāo)準(zhǔn)品    121-54-0    500mg
Gadoteridol     釓特醇標(biāo)準(zhǔn)品    120066-54-8     500mg
Flumazenil Related Compound C    *相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品    1188-33-6     500mg
Homosalate     原膜散酯標(biāo)準(zhǔn)品    118-56-9     500mg
    柳酸苯酯熔點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)物標(biāo)準(zhǔn)品    118-55-8     500mg
Paramethadione    對(duì)甲雙酮標(biāo)準(zhǔn)品    115-67-3     500mg
Methyl Oleate     油酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)品    112-62-9     500mg
    *相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品    112537-96-9     500mg
細(xì)胞培養(yǎng)