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    細(xì)胞凋亡檢測的主要特征及檢查方法

    時(shí)間:2017-10-27閱讀:221
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    細(xì)胞凋亡檢測的主要特征為核染色質(zhì)致密深染,形成致密質(zhì)塊,有時(shí)可碎裂。在HE染色的組織切片中細(xì)胞體積縮小,胞質(zhì)致密、嗜酸性染色增強(qiáng),并可形成凋亡小體。在組織中凋亡細(xì)胞常以分散單個(gè)形式存在,凋亡細(xì)胞與周圍細(xì)胞分離,不引起炎癥反應(yīng)。

    本方法簡便易行,但在細(xì)胞密集的組織中對(duì)于改變不典型的細(xì)胞判斷較困難,常缺乏較為特征的指標(biāo),具有較強(qiáng)的主觀性,重復(fù)性差。本方法可用于調(diào)亡現(xiàn)象的初步觀察,作為分析指標(biāo)之一。

    檢測方法:細(xì)胞涂片或組織石蠟切片作HE染色或Giemsa染色,在高倍物鏡下觀察凋亡細(xì)胞的形態(tài)改變,結(jié)合顯微測量工具可作凋亡細(xì)胞計(jì)數(shù)。

    二、視頻時(shí)差顯微技術(shù)
    本方法用于細(xì)胞培養(yǎng),通過相差顯微鏡可動(dòng)態(tài)觀察細(xì)胞凋亡的變化過程,尤其是觀察細(xì)胞表和外形的變化。凋胞與基質(zhì)分離,胞體變圓、收縮、出泡,有的細(xì)胞拉長,出現(xiàn)釘狀突起,特續(xù)數(shù)小時(shí)后細(xì)胞膜破裂,細(xì)胞溶解,通過連續(xù)觀察,本方法可養(yǎng)壑培養(yǎng)中的凋亡細(xì)胞,但不能用于病理組織。

    細(xì)胞凋亡檢測檢測方法:收集2×105細(xì)胞/ml培胞,置于多孔培養(yǎng)板,加入凋亡誘導(dǎo)劑,在帶有自動(dòng)攝像裝置的相差顯微鏡下觀察凋亡細(xì)胞的動(dòng)態(tài)改變,每隔分鐘30秒作序列攝影,連續(xù)24小時(shí)。如同進(jìn)進(jìn)行熒光染色,可參熒光晃微鏡下觀察和攝影。
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    細(xì)胞凋亡檢測

     

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