細胞凋亡檢測購買注意事項

由于現在國內的細胞凋亡檢測資料不是很充足，而且比較零散，包括建株時的技術層面不一，沒有比較嚴格統一的操作規范，所以在遇到比較重要的實驗項目時，一般都比較傾向于購買國外的細胞株，但購買國外細胞株需要考慮的因素有如下幾點：
1、細胞株的生物等級，由于有些細胞株及菌株屬于管制品，所以從國外購貨比較麻煩。
2、在購買國外細胞株時，需交待國外加比較多的干冰(一般在13公斤以上，采用比較密封的泡沫盒加套紙箱。
3、報關時盡量提供比較充足的證明材料，以免擔擱時間而導致干冰揮發完細胞株死亡，甚至于被退回給發貨人。
4、如果通過國外細胞株在國內的代理商購買的話，合同中需注明以下一些內容：
a.明確的到貨時間，這個時間需注明的是工作日，還是普通日。
B.采用什么樣的運輸方法?
C.如果屬于技術外的因素而細胞株無法培養活，供方需負什么樣的責任?
D.細胞株的詳細資料，以及細胞株的代數，其中，ATCC的細胞株一般都在幾十代,這個需要與國外確認，IST-Banca可與他們的代理商索取詳細資料!
E.需在合同中注明*，避免相關魚龍渾雜，從國外購買回一株細胞株，經過培養傳代后，同時供應給幾個人;一般國外進口的細胞株都會有原裝的凍存管，而且每一支凍存管上都會有批號，而且每次的批號都不一樣。
F.在決定購買細胞株之前，必須仔細閱讀他們的培養信息，所謂“細胞株未到，培養基先行一步"。
G.在接到細胞株后，要求供應我的人員現場參與，從而用于確認責任。
H.在培養前，請確認您的二氧化碳培養箱二氧化碳濃度的準確性，國外的細胞株建議用進口的細胞培養瓶，比如：orange，corning, falcon品牌的培養瓶。
I.詢問你的代理商或者經銷商，接到細胞株后是否需要離心置換出DMSO，因為有些細胞廠家建議不要離心，他們會認為離心而導致的碎片比DMSO產生毒性的害處更大，如果可以離心，轉速不要過高，一般都在1000轉以下，此處需要注意，因為有的會拿這一點來拒絕索賠!
J.培養基的服務，仔細與供應商確認培養基的品牌及份量，以免供應商以些理由來推倒你索賠的理由。
K.在細胞凋亡檢測復蘇時，一定要先想好步驟再做，一步一步來做，避免導致操作中的污染，復蘇是一個非常重要的步驟，往往容易導致污染，然后為污染所導致的雜質而傷透腦筋。
細胞運輸中，還要注意細胞株的反復凍融情況，有的供應商在供應細胞株或者培養基時，特別是需要低溫保存的培養基時，通常會出現運輸溫度與儲存溫度的差別，而導致培養基或細胞株融掉后又放進低溫冰箱進行凍存，然后再快遞給我們，特別是血清類制品，如果在接到培養基并解凍后，沉淀和絮狀物較多時，那就要懷疑是否是這種情況!
對于所買回來的細胞簽別，除了顯微鏡下的形態學觀察，還有就是特異性實驗，這也是比較重要的!細胞株有些時候復蘇后剛培養的時候，老師們發現從形態上判斷似乎不是自己所需要的細胞株，于是我就建議他做細胞屬性的特異性實驗，ATCC的技術資料后面附有細胞株的代數，以及細胞株經過了哪些檢測，細胞株特異性實驗的方法，從而用以確認真正是自己所需要的細胞株!凍存的細胞株，特別是從國外進口的細胞株，應該立即復蘇，盡量不要再凍存，反復凍融會導致細胞株復蘇后的活性低!*次接種培養時，應以進口的25平方厘米的培養瓶為佳，現在市面上的主要有orange,cornig,BD(Falcon),其中orange價格比較公道5-6元/個，BD(Falcon)貴10元左右每個，BD的產品一般用于醫院中心實驗室人工受精卵的一到三代培養!ATCC的細胞株培養基分為*培養基(原代培養)，次培養基(傳代培養基)，請大家要注意!
如果細胞運來后，應該馬上進行復蘇，復蘇時，迅速投入37攝氏度水浴中并不斷振搖，使之迅速融化，離心應在1000轉/分以下，如果太高速會使本來脆弱的細胞凋亡檢測產生較多的碎片，培養過程中，甚至會因為碎片而出現黑點(一般都是800r/min,5min)，棄上清液，以去除二甲基亞砜。加入先前配好的培養基，并在50ml培養瓶中進行培養。