細(xì)胞凋亡之線粒體膜電位檢測(cè)

細(xì)胞凋亡檢測(cè)線粒體膜電位與細(xì)胞凋亡的關(guān)系
線粒體為一雙層膜圍成的囊狀結(jié)構(gòu), 外膜與內(nèi)膜間的空腔稱為外室, 由內(nèi)膜包圍的腔稱為內(nèi)室或線粒體基質(zhì).線粒體外膜通透性較大, 分子質(zhì)量在15 ku 以下物質(zhì)可自由通過(guò), 因此胞質(zhì)成分與線粒體外室基本相似. 線粒體內(nèi)膜通透性小, 分子質(zhì)量大于1.5 ku 物質(zhì)不易通過(guò).但內(nèi)膜存在一些載體蛋白與通道以便運(yùn)輸某些物質(zhì). 質(zhì)子泵存在于內(nèi)膜, 它將基質(zhì)內(nèi)質(zhì)子泵入外室, 從而形成橫跨線粒體內(nèi)膜的線粒體跨膜電位( mitochondrial transmembrane potential , Δψm ) .跨膜電位內(nèi)室為負(fù), 外室為正.使一些正電荷熒光染料如rhodamine 123 、DiOC6 (3) 、JC-1 、CMX-ROS 可結(jié)合到線粒體基質(zhì)。

實(shí)驗(yàn)步驟——線粒體膜電位（JC-1染色）

1．收集細(xì)胞：包括漂浮在培養(yǎng)基上的細(xì)胞；之后，PBS或培養(yǎng)基重懸送樣，正常組細(xì)胞分出200μl體積不染色；
2．離心：1000轉(zhuǎn)/分，5分鐘，棄上清；
3．染色：加入200μl JC-1染液，混勻，37℃避光孵育15分鐘，上機(jī)；
4.洗滌：加入500μl 洗液；
5．離心：1000轉(zhuǎn)/分，5分鐘，棄上清，加入200μl 洗液，混勻，上機(jī)
JC-1做線粒體膜電位的優(yōu)缺點(diǎn)
JC-1比Rhodamine 123更靈敏，比DIOC6(3)特異性更高；但細(xì)胞凋亡檢測(cè)JC-1占用了紅、綠熒光通道，很難與其它染料共用，而且對(duì)溫度、pH敏感。
人*(Cyt-C)ELISA試劑盒    進(jìn)口/分裝    Human Cytochrome-C，Cyt-C ELISA Kit                        
人脂蛋白脂酶(LPL)ELISA試劑盒    進(jìn)口/分裝    Human lipoprotein lipase，LPL ELISA Kit                        
人脂蛋白α(Lp-α)ELISA試劑盒    進(jìn)口/分裝    Human lipoprotein α，Lp-α ELISA Kit                        
人骨膠原交聯(lián)(Cr)ELISA試劑盒    進(jìn)口/分裝    Human Crosslaps，Cr ELISA Kit                        
人Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)ELISA試劑盒    進(jìn)口/分裝    Human cross-linked C-opeptides of Type Ⅰ collagen，CⅠCP ELISA Kit
細(xì)胞凋亡檢測(cè)