Cas9穩定表達的人胰腺癌細胞；PANC-1-Cas9-555操作步驟 返回列表頁

Cas9穩定表達的人胰腺癌細胞；PANC-1-Cas9-555操作步驟操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內，吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量*，使*的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*，加入新鮮培養基，晃動細胞瓶，終止*作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液。控制吹打的力度，避免產生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養基，置37℃溫箱培養，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉移到無菌離心管內，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養基，置37℃溫箱培養。

細胞名稱   Cas9穩定表達的人胰腺癌細胞；PANC-1-Cas9-555操作步驟
形態特性 上皮樣；多角形

生長特性 貼壁生長

特征特性 該細胞是采用慢病毒感染的方式使PANC-1細胞穩定表達Cas9-Flag-Neo，經400ug/mlG418篩選得到的單克隆，經Western Blotting驗證該克隆可以表達Cas9蛋白，可直接用Crispr技術編輯基因組DNA。

培養條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS；400ug/ml G418

傳代方法 1:2~1:4傳代；每周2~3次。

傳代情況 C3

凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS

支原體檢測 培養法（-）

STR Amelogenin：x,x；CSF1PO：10,12；D12S391：22,22；D13S317：11,11；D16S539：11,11；D18S51：12,12；D19S433：11,16；D21S11：28,28；D2S1338：23,24；D3S1358：17,17；D5S818：11,13；D6S1043：11,12；D7S820：8,10；D8S1179：14,15；FGA：21,21；；Penta E：7,14；TH01：7,8；TPOX：8,11；vWA：15,15；

同工酶

染色體

使用權限 A類

Cas9穩定表達的人胰腺癌細胞；PANC-1-Cas9-555操作步驟細胞培養
1、冷凍管應如何解凍？
取出冷凍管后， 須立即放入37 ℃水槽中快速解凍， 輕搖冷凍管使其在1 分鐘內全部融化， 并注意水面不可超過冷凍管蓋沿， 否則易發生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時， 必須注意安全， 預防冷凍管之爆裂。
2、細胞冷凍管解凍培養時， 是否應馬上去除DMSO？
除少數特別注明對DMSO 敏感之細胞外， 絕大部分細胞株（包括懸浮性細胞）， 在解凍之后， 應直接放入含有10-15ml新鮮培養基之培養角瓶中， 待隔天再置換新鮮培養基以去除DMSO 即可， 如此可避免大部分解凍后細胞無法生長或貼附之問題。
3、可否使用與原先培養條件不同之培養基？
不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養基， 若驟然使用和原先提供之培養條件不同之培養基， 細胞大都無法立即適應， 造成細胞無法存活。
4、可否使用與原先培養條件不同之血清種類？
不能。血清是細胞培養上一個極為重要的營養來源， 所以血清的種類和品質對于細胞的生長會產生*的影響。來自不同物種的血清， 在一些物質或分子的量或內容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細胞;NK-92 [NK92]

TGFBR3 Others Mouse 小鼠 TGFBR3 / Betaglycan 人細胞裂解液 (陽性對照)

NCI-H446 人小細胞肺癌細胞

hDPSCs, 人前磨牙牙髓干細胞

人臍動脈平滑肌細胞

人正常上皮細胞;MCF 10A 人胰腺星狀細胞*培養基 100mL
SHPK Others Human 人 CARKL / SHPK 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

CM-H055人卵巢上皮細胞*培養基100mL

人中腦星形膠質細胞HA-mb

非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS2;Vero-HCV-NS2 人癌細胞，HCC1428細胞 LTEP-a-2(肺腺癌細胞)

人成骨肉瘤細胞;Saos-2

OLFM4 Others Human 人 OLFM4 / Olfactomedin-4 人細胞裂解液 (陽性對照)
CM-H055人卵巢上皮細胞*培養基100mL

SHPK Others Human 人 CARKL / SHPK 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

人中腦星形膠質細胞HA-mb

非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS2;Vero-HCV-NS2 人癌細胞，HCC1428細胞 LTEP-a-2(肺腺癌細胞)

人成骨肉瘤細胞;Saos-2

OLFM4 Others Human 人 OLFM4 / Olfactomedin-4 人細胞裂解液 (陽性對照)
菌種保存培養基  進口分裝  四氫姜黃素   Tetrahydrocurcumin  號：  36062-04-1  質量規格：  HPLC≥98%,BR

BF839菌計數選擇培養基  進口分裝  LY2886721   LY-2886721  號：  1262036-50-9  質量規格：  >98，BACE1 inhibitor

PyridoxineYmedium  進口分裝  美芬諾  Mephenoxalone  號：  25754  質量規格：  >98%

CelluloseC
大鼠C型鈉尿肽elisa試劑盒  進口分裝  呫噸酸（標準品）  Xanthene-9-carboxylic acid  號：  31963  質量規格：  供檢查用

大鼠C反應蛋白elisa試劑盒  進口分裝  呫噸（標準品）  Xanthone  號：  97-47-1  質量規格：  供HPLC法有關物質檢查用

大鼠D-乳酸脫氫酶elisa試劑盒  進口分裝  正己酸（標準品）  Hexanoic acid  號：  142-62-1  質量規格：  鑒別

大鼠E鈣黏蛋白elisa試劑盒  進口分裝  甲基*（標準品）  Methyl eugenol  號：  93-15-2  質量規格：  含量測定
Cas9穩定表達的人胰腺癌細胞；PANC-1-Cas9-555操作步驟D49mm透析袋(透析分子量12000-14000)  進口分裝  Fluorescein,DisodiumSalt

1ml一次性注射器(100支/盒)  進口分裝  葡萄糖-6-磷酸脫氫酶

10×TBS  進口分裝  Hemoglobin,FromBovilood

1MTrispH6.8  進口分裝  INT

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