Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人胰腺癌細(xì)胞；PANC-1-Cas9-558實(shí)驗(yàn)方法 返回列表頁(yè)

細(xì)胞名稱(chēng)  Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人胰腺癌細(xì)胞；PANC-1-Cas9-558實(shí)驗(yàn)方法
形態(tài)特性 上皮樣；多角形

生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)

特征特性 該細(xì)胞是采用慢病毒感染的方式使PANC-1細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)Cas9-Flag-Neo，經(jīng)400ug/mlG418篩選得到的單克隆，經(jīng)Western Blotting驗(yàn)證該克隆可以表達(dá)Cas9蛋白，可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA。

培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS；400ug/ml G418

傳代方法 1:2~1:4傳代；每周2~3次。

傳代情況 C3

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法（-）

STR Amelogenin：x,x；CSF1PO：10,12；D12S391：22,22；D13S317：11,11；D16S539：11,11；D18S51：12,12；D19S433：11,16；D21S11：28,28；D2S1338：23,24；D3S1358：17,17；D5S818：11,13；D6S1043：11,12；D7S820：8,10；D8S1179：14,15；FGA：21,21；；Penta E：7,14；TH01：7,8；TPOX：8,11；vWA：15,15；

同工酶

染色體

使用權(quán)限 A類(lèi)

Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人胰腺癌細(xì)胞；PANC-1-Cas9-558實(shí)驗(yàn)方法的運(yùn)輸和保存
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶(hù)協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿(mǎn)干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿(mǎn)*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人胰腺癌細(xì)胞；PANC-1-Cas9-558實(shí)驗(yàn)方法復(fù)蘇操作要點(diǎn)： 
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。 
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿(mǎn)37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過(guò)zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中，BIU-87(人膀胱癌細(xì)胞)避免引起污染。 
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。 
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。 
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。 
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞cDNAHUMSC cDNA

TH Others Human 人 TH / Tyrosine Hydroxylase 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

大鼠雪旺細(xì)胞;RSC96

LTEP-a-2細(xì)胞，肺腺癌細(xì)胞 人喉表皮樣癌細(xì)胞,HEp-2細(xì)胞 tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細(xì)胞(B類(lèi));Pan02-CAG-tTA-4C5

雜交瘤(B類(lèi));Z1510A2G6A2F8

INSR Others Human 人 Insulin Receptor / INSR / CD220 ( Short
ACVRL1 Others Cynomolgus 食蟹猴 ALK-1 / ACVRL1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

CM-H049人直腸平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

人星形膠質(zhì)細(xì)胞HA

HL60細(xì)胞，人原髓細(xì)胞白血病細(xì)胞 大鼠骨髓瘤細(xì)胞,IR983F細(xì)胞 角質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基KM

MDA-MB-436(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

AsPC-1(人胰腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CM-R091大鼠成骨細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KM0501
CM-H049人直腸平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

ACVRL1 Others Cynomolgus 食蟹猴 ALK-1 / ACVRL1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人星形膠質(zhì)細(xì)胞HA

HL60細(xì)胞，人原髓細(xì)胞白血病細(xì)胞 大鼠骨髓瘤細(xì)胞,IR983F細(xì)胞 角質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基KM

MDA-MB-436(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

AsPC-1(人胰腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CM-R091大鼠成骨細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KM0501
BileLactoseMedium  進(jìn)口分裝  N-乙酰-DL-甲  N-Acetyl-DL-mine  號(hào)：  1115-47-5  質(zhì)量規(guī)格：  0.99

RoseBengalMedium  進(jìn)口分裝  Tris,三羥甲基基甲烷;丁三醇;緩血酸銨  Tris  號(hào)：  77-86-1  質(zhì)量規(guī)格：  >99.5%,分子生物學(xué)級(jí)

SDAY培養(yǎng)基  進(jìn)口分裝  醋酸*β4   Thymosin β4 Acetate  號(hào)：  77591-33-4  質(zhì)量規(guī)格：  >95%,BR

無(wú)
大鼠凋亡相關(guān)因子elisa試劑盒  進(jìn)口分裝  *（標(biāo)準(zhǔn)品）  Fosinopril sodium  號(hào)：  88889-14-9  質(zhì)量規(guī)格：  含量測(cè)定

大鼠*elisa試劑盒  進(jìn)口分裝  膦鈉（標(biāo)準(zhǔn)品）  Foscarnet sodium  號(hào)：  63585-09-1  質(zhì)量規(guī)格：  UV法含量測(cè)定

大鼠凋亡相關(guān)因子配體elisa試劑盒  進(jìn)口分裝  無(wú)水*（標(biāo)準(zhǔn)品）  Sodium Dihydrogen Phosphate Anhydrous  號(hào)：  7558-80-7  質(zhì)量規(guī)格：  供檢查用

大鼠第八因子相關(guān)抗原elisa試劑盒  進(jìn)口分裝  亞*（標(biāo)準(zhǔn)品）  Disodium phosphite pentahydrate  號(hào)：  13517-23-2  質(zhì)量規(guī)格：  供檢查用
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人胰腺癌細(xì)胞；PANC-1-Cas9-558實(shí)驗(yàn)方法模擬蒸餾分析柱  進(jìn)口分裝  四甲基

VF-XmsGC毛細(xì)管柱  進(jìn)口分裝  2-乙

GC農(nóng)藥分析柱  進(jìn)口分裝  6-HydroxydopamineHydrobromide

COSMOSILHILIC親水作用HPLC柱  進(jìn)口分裝  乙酰L-肉堿鹽酸鹽

公司是*的ATCC細(xì)胞供應(yīng)商，提供Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人胰腺癌細(xì)胞；PANC-1-Cas9-558實(shí)驗(yàn)方法的報(bào)價(jià)，咨詢(xún)，稱(chēng)技術(shù)服務(wù)，咨詢(xún)選購(gòu)