Cas9穩定表達的人胰腺癌細胞；PANC-1-Cas9-559操作步驟 返回列表頁

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細胞名稱  Cas9穩定表達的人胰腺癌細胞；PANC-1-Cas9-559操作步驟
形態特性 上皮樣；多角形

生長特性 貼壁生長

特征特性 該細胞是采用慢病毒感染的方式使PANC-1細胞穩定表達Cas9-Flag-Neo，經400ug/mlG418篩選得到的單克隆，經Western Blotting驗證該克隆可以表達Cas9蛋白，可直接用Crispr技術編輯基因組DNA。

培養條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS；400ug/ml G418

傳代方法 1:2~1:4傳代；每周2~3次。

傳代情況 C3

凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS

支原體檢測 培養法（-）

STR Amelogenin：x,x；CSF1PO：10,12；D12S391：22,22；D13S317：11,11；D16S539：11,11；D18S51：12,12；D19S433：11,16；D21S11：28,28；D2S1338：23,24；D3S1358：17,17；D5S818：11,13；D6S1043：11,12；D7S820：8,10；D8S1179：14,15；FGA：21,21；；Penta E：7,14；TH01：7,8；TPOX：8,11；vWA：15,15；

同工酶

染色體

使用權限 A類

Cas9穩定表達的人胰腺癌細胞；PANC-1-Cas9-559操作步驟的運輸和保存
視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養，如無法立刻進行復蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
Cas9穩定表達的人胰腺癌細胞；PANC-1-Cas9-559操作步驟復蘇操作要點： 
1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。 
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。 
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。 
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。 
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。 
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
SV40轉染人成骨細胞;hFOB 1.19

TH Others Mouse 小鼠 TH / Tyrosine Hydroxylase 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

CM-H038人直結腸平滑肌細胞*培養基100mL

CaEs-17, 人食管癌細胞株 癌細胞,SHZ-88細胞 SJCRH30 [RC13; RMS 13; SJRH30](人骨髓橫紋肌肉癌細胞)

正常小鼠Leydig細胞;TM3

CD3D Others Human 人 CD3D 人細胞裂解液 (陽性對照)
PDHA1 Others Human 人 PDHA1 / C54G1 (aa 30-390) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

CM-H047人肝竇內皮細胞*培養基100mL

人少突膠質細胞HO

非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS3;Vero-HCV-NS3 人腎癌細胞，A-704細胞 AGS(胃腺癌細胞)

人神經母細胞瘤細胞;SH-SY5Y

FGF18 Others Mouse 小鼠 FGF18 / FGF-18 人細胞裂解液 (陽性對照)
CM-H047人肝竇內皮細胞*培養基100mL

PDHA1 Others Human 人 PDHA1 / C54G1 (aa 30-390) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

人少突膠質細胞HO

非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS3;Vero-HCV-NS3 人腎癌細胞，A-704細胞 AGS(胃腺癌細胞)

人神經母細胞瘤細胞;SH-SY5Y

FGF18 Others Mouse 小鼠 FGF18 / FGF-18 人細胞裂解液 (陽性對照)
CookedMeatMediumBase  進口分裝  Cbz-L-蘇酸芐酯  N-Cbz-L-threonine Benzyl Ester  號：  16597-50-5  質量規格：  0.98

天然礦泉水檢驗培養基  進口分裝  *酯鈉鹽  Sodium cholesteryl sulfate  號：  2864-50-8  質量規格：  >98%,BR

ThiolglycollateMedium  進口分裝  D-色酸  D-Tryptophan  號：  153-94-6
大鼠抗內皮細胞抗體elisa試劑盒  進口分裝  *（標準品）  Difenidol Hydrochloride  號：  3254-89-5   質量規格：  供含量測定用

大鼠抗*Ⅲ抗體elisa試劑盒  進口分裝  鹽酸*  Urapidil Hydrochloride  號：  64887-14-5  質量規格：  >99%,BR

大鼠抗*受體elisa試劑盒  進口分裝  鹽酸*（標準品）  Urapidil Hydrochloride  號：  64887-14-5  質量規格：  含量測定

大鼠抗平滑肌抗體elisa試劑盒  進口分裝  鹽酸*（標準品）  Flunarizine Hydrochloride  號：  30484-77-6  質量規格：  含量測定
Cas9穩定表達的人胰腺癌細胞；PANC-1-Cas9-559操作步驟藍蓋玻璃瓶  進口分裝  VirusDNA-RNAIsolationKit

8道可調移液器  進口分裝  PfuDNA聚合酶

Biohit單道可調半支滅菌移液器  進口分裝  ApoptoticDNALadderExtractionKit

單道雷勃彩色移液器（全彩）  進口分裝  吉姆薩染色劑