Cas9穩定表達的人前列腺癌細胞；PC-3-Cas9-579操作步驟 返回列表頁

Cas9穩定表達的人前列腺癌細胞；PC-3-Cas9-579操作步驟操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內，吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量*，使*的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*，加入新鮮培養基，晃動細胞瓶，終止*作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液。控制吹打的力度，避免產生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養基，置37℃溫箱培養，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉移到無菌離心管內，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養基，置37℃溫箱培養。

細胞名稱   Cas9穩定表達的人前列腺癌細胞；PC-3-Cas9-579操作步驟
形態特性 上皮樣

生長特性 貼壁生長,在軟瓊脂中成簇生長，并可懸浮生長

特征特性 該細胞是采用慢病毒感染的方式使PC-3細胞穩定表達Cas9-Flag-Neo，經400ug/mlG418篩選得到的單克隆，經Western Blotting驗證該克隆可以表達Cas9蛋白，可直接用Crispr技術編輯基因組DNA。

培養條件 F12K 10%FBS；400ug/ml G418

傳代方法 1:3~1:6傳代；每周2~3次換液。

傳代情況 C3

凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS

支原體檢測 培養法（-）

STR Amelogenin：x,x；CSF1PO：11,11；D12S391：21,21；D13S317：11,11；D16S539：11,11；D18S51：14,15；D19S433：14,14；D21S11：29,31.2；D2S1338：18,20；D3S1358：16,16；D5S818：13,13；D6S1043：18,18；D7S820：8,11；D8S1179：13,13；FGA：24,24；Penta E：10,17；TH01：6,7；TPOX：8,9；vWA：17,17；

同工酶

染色體

使用權限 A類

Cas9穩定表達的人前列腺癌細胞；PC-3-Cas9-579操作步驟細胞培養
1、冷凍管應如何解凍？
取出冷凍管后， 須立即放入37 ℃水槽中快速解凍， 輕搖冷凍管使其在1 分鐘內全部融化， 并注意水面不可超過冷凍管蓋沿， 否則易發生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時， 必須注意安全， 預防冷凍管之爆裂。
2、細胞冷凍管解凍培養時， 是否應馬上去除DMSO？
除少數特別注明對DMSO 敏感之細胞外， 絕大部分細胞株（包括懸浮性細胞）， 在解凍之后， 應直接放入含有10-15ml新鮮培養基之培養角瓶中， 待隔天再置換新鮮培養基以去除DMSO 即可， 如此可避免大部分解凍后細胞無法生長或貼附之問題。
3、可否使用與原先培養條件不同之培養基？
不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養基， 若驟然使用和原先提供之培養條件不同之培養基， 細胞大都無法立即適應， 造成細胞無法存活。
4、可否使用與原先培養條件不同之血清種類？
不能。血清是細胞培養上一個極為重要的營養來源， 所以血清的種類和品質對于細胞的生長會產生*的影響。來自不同物種的血清， 在一些物質或分子的量或內容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
穩定表達EBNA1的人胚腎細胞;293E

TMED4 Others Human 人 TMED4 / ERS25 人細胞裂解液 (陽性對照)

CL-0376LA795(小鼠肺腺癌細胞)5×106cells/瓶×2

Pcc4細胞，胚癌細胞 人白血病細胞,SK細胞 Asp2人胚胎腎細胞轉化細胞;FC33

高背鯽魚尾鰭細胞;GBJd

CST7 Others Human 人 Cystatin-F / CST7 / Cystatin-7 人細胞裂解液 (陽性對照)
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Cambodia/S1211394/2008) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照)

CM-H020人胰島β細胞*培養基100mL

*(含10mL 酶解緩沖液) 1mL

U-373MG-EGFP-puro[U-373MG-pLVT7](慢病毒構建穩定株)人腦神經膠質瘤細胞 U-373MG-EGFP-puro[U-373MG-pLVT7] (lentiviral construct stable strain) of human brain glioma cells 1640+10%Hyclone 滅活血清+2μg/ml puromycin

IL21 Protein Rat 重組大鼠 IL21 / Interleukin 21 蛋白 (His 標簽)

人表皮角質細胞-新生兒(HEK-n)( 5×105 ) 細胞名稱 種屬
CM-H020人胰島β細胞*培養基100mL

HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Cambodia/S1211394/2008) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照)

*(含10mL 酶解緩沖液) 1mL

U-373MG-EGFP-puro[U-373MG-pLVT7](慢病毒構建穩定株)人腦神經膠質瘤細胞 U-373MG-EGFP-puro[U-373MG-pLVT7] (lentiviral construct stable strain) of human brain glioma cells 1640+10%Hyclone 滅活血清+2μg/ml puromycin

IL21 Protein Rat 重組大鼠 IL21 / Interleukin 21 蛋白 (His 標簽)

人表皮角質細胞-新生兒(HEK-n)( 5×105 ) 細胞名稱 種屬
醋酸醋桿菌食用支/瓶  進口分裝  DL-乳酸(USP)  DL-Lactic acid  號：  50-21-5  質量規格：  88~92%，USP

短短芽孢桿菌支/瓶  進口分裝  沒食子酸一水物(標準品)  Gallic acid monohydrate  號：  5995-86-8  質量規格：  HPLC>98%,標準品

佛羅里達側耳、蠔菇支/瓶  進口分裝  蜜二糖  Melibiose  號：  585-99-9  質量規格：  >98%,水合物

海藻希瓦氏菌產*支/
人抗肝細胞膜抗體elisa試劑盒  進口分裝  D-*（標準品）  D-Pinitol  號：  10284-63-6  質量規格：  95%，標準品

人抗肝細胞胞質1型抗體elisa試劑盒  進口分裝  松果菊苷（標準品）  Echinacoside  號：  82854-37-3  質量規格：  HPLC≥98%，標準品

人抗肝特異性脂蛋白抗體elisa試劑盒  進口分裝  松蘿酸(標準品)  Usnic acid  號：  125-46-2  質量規格：  HPLC≥98%，標準品

人抗Sc1-70抗體elisa試劑盒  進口分裝  松脂醇二葡萄糖苷（標準品）  Pinoresinol diglucoside  號：  63902-38-5  質量規格：  HPLC≥98%，標準品
Cas9穩定表達的人前列腺癌細胞；PC-3-Cas9-579操作步驟人生長分化因子6(GDF6)酶聯免疫吸附測定試劑盒  進口分裝   酸性紅9  英文名稱：  Acid red 9  號：  8003-59-6  分子式：  400.38  分子量：   C20H13N2NaO4S

人頭蛋白(NOG)酶聯免疫吸附測定試劑盒  進口分裝   直接青蓮N  英文名稱：  Direct violet n  號：  2586-60-9  分子式：  728.66  分子量：   C32H22N6Na2O8S2

人糖基化依賴的細胞黏附分子(GlyCAM1)酶聯免疫吸附測定試劑盒  進口分裝   6-溴靛紅  英文名稱：  Isatin 6- bromide  號：  77603-45-3  分子式：  226.03  分子量：   C8H4BrNO2

人胞漿磷蛋白1(STMN1)酶聯免疫吸附測定試劑盒  進口分裝   噻唑藍(MTT)  英文名稱：  Thiazolyl blue (MTT)  號：  298-93-1  分子式：  414.32  分子量：   C18H16BrN5S

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