Cas9穩定表達的人子宮內膜腺癌細胞；HEC-1-B-Cas9-590實驗方法 返回列表頁

細胞名稱   Cas9穩定表達的人子宮內膜腺癌細胞；HEC-1-B-Cas9-590實驗方法
形態特性 上皮樣

生長特性 貼壁生長

特征特性 該細胞是采用慢病毒感染的方式使HEC-1B細胞穩定表達Cas9-Flag-Puromycin，經2ug/ml嘌呤霉素篩選得到的單克隆，經Western Blotting驗證該克隆可以表達Cas9蛋白，可直接用Crispr技術編輯基因組DNA。

培養條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS；2ug/ml Puromycin

傳代方法 消化3-5分鐘；1:2傳代；3天內可長滿。

傳代情況 C3

凍存條件 *培養基+8%DMSO

支原體檢測 陰性

STR Amelogenin：x,x；CSF1PO：10,12；D12S391：18,19；D13S317：11,11；D16S539：11,12；D18S51：16,20；D19S433：13,13；D21S11：30,31；D2S1338：18,19；D3S1358：15,15；D5S818：11,13；D6S1043：12,18；D7S820：9,11；D8S1179：13,14；FGA：21,21；Penta E：11,11；TH01：6,7；TPOX：8,11；vWA：18,18；

同工酶

染色體

使用權限 A類

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Cas9穩定表達的人子宮內膜腺癌細胞；HEC-1-B-Cas9-590實驗方法細胞培養
1、冷凍管應如何解凍？
取出冷凍管后， 須立即放入37 ℃水槽中快速解凍， 輕搖冷凍管使其在1 分鐘內全部融化， 并注意水面不可超過冷凍管蓋沿， 否則易發生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時， 必須注意安全， 預防冷凍管之爆裂。
2、細胞冷凍管解凍培養時， 是否應馬上去除DMSO？
除少數特別注明對DMSO 敏感之細胞外， 絕大部分細胞株（包括懸浮性細胞）， 在解凍之后， 應直接放入含有10-15ml新鮮培養基之培養角瓶中， 待隔天再置換新鮮培養基以去除DMSO 即可， 如此可避免大部分解凍后細胞無法生長或貼附之問題。
3、可否使用與原先培養條件不同之培養基？
不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養基， 若驟然使用和原先提供之培養條件不同之培養基， 細胞大都無法立即適應， 造成細胞無法存活。
4、可否使用與原先培養條件不同之血清種類？
不能。血清是細胞培養上一個極為重要的營養來源， 所以血清的種類和品質對于細胞的生長會產生*的影響。來自不同物種的血清， 在一些物質或分子的量或內容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
Cas9穩定表達的人子宮內膜腺癌細胞；HEC-1-B-Cas9-590實驗方法操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內，吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量*，使*的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*，加入新鮮培養基，晃動細胞瓶，終止*作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液。控制吹打的力度，避免產生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養基，置37℃溫箱培養，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉移到無菌離心管內，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養基，置37℃溫箱培養。
造骨細胞生長添加物ObGS

TNFRSF13B Others Human 人 TNFRSF13B / TACI / CD267 人細胞裂解液 (陽性對照)

CP-88 草魚胚胎細胞

CL-00063T3-L1(小鼠胚胎成纖維細胞)5×106cells/瓶×2

HK-2, 人腎皮質近曲小管上皮細胞

EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KM9803 人顱蓋造骨細胞*培養基 100mL
CXCL16 Others Rat 大鼠 CXCL16 / SR-PSOX 人細胞裂解液 (陽性對照)

CL-0467WPMY-1(人正常前列腺基質永生化細胞)5×106cells/瓶×2

大鼠虹膜色素上皮細胞*培養基 100mL

U-373MG人腦神經膠質瘤細胞 U-373MG glioma cells DMEM+10% FBS

IL1B Protein Rabbit 重組兔 IL-1 beta / IL1B 蛋白

NCI-H358(人非小細胞肺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 PC-12(腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞)
CL-0467WPMY-1(人正常前列腺基質永生化細胞)5×106cells/瓶×2

CXCL16 Others Rat 大鼠 CXCL16 / SR-PSOX 人細胞裂解液 (陽性對照)

大鼠虹膜色素上皮細胞*培養基 100mL

U-373MG人腦神經膠質瘤細胞 U-373MG glioma cells DMEM+10% FBS

IL1B Protein Rabbit 重組兔 IL-1 beta / IL1B 蛋白

NCI-H358(人非小細胞肺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 PC-12(腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞)
抗生素檢定培養基1號(高PH)250用于*，*，*，*等效價測定incubationmedia抗生素檢定培養基1號(高PH)250用于*，*，*，*等效價測定  進口分裝  雌三醇(標準品)  Estriol  號：  50-27-1  質量規格：  HPLC>97%,標準品

克氏雙糖鐵瓊脂250用于細菌復合生化試驗(葡萄糖，乳糖)incubationmedia克氏雙糖鐵瓊脂250用于細菌復合生化試驗(葡萄糖，乳糖)  進口分裝  氫噻嗪（標準品）  Hydr
人血管活性腸肽elisa試劑盒  進口分裝  次(標準品)  Hyp  號：  6900-87-4  質量規格：  HPLC≥98%，標準品

人旋毛蟲抗體elisa試劑盒  進口分裝  次野鳶尾黃素（標準品）  Irisflorentin  號：  41743-73-1  質量規格：  HPLC≥98%，標準品

人溴脫氧核苷*elisa試劑盒  進口分裝  刺芒柄花苷（標準品）  Ononin  號：  486-62-4  質量規格：  HPLC≥98%，標準品

人雄烯二elisa試劑盒  進口分裝  刺五加苷E（標準品）  Eleutheroside E  號：  39432-56-9  質量規格：  HPLC≥98%，標準品
Cas9穩定表達的人子宮內膜腺癌細胞；HEC-1-B-Cas9-590實驗方法德國進口金屬離子、化學成分定性測試紙  進口分裝  41753-55-3  Ophiopogonin D  C44H70O16  855.02  Steroids  >=98%  20mg

DPD余測定試劑盒  進口分裝      C41H64O14  780.94  Steroids  >=98%  20mg

硫化物測定試劑盒  進口分裝  473-98-3  Betulin  C30H50O2  442.7  Triterpenoids  >=98%  20mg

酶（CAT）試劑盒  進口分裝  1011850  Theaflavin  C29H24O12  564.49  Flavonoids  >=99%  20mg

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