Cas9穩定表達的人子宮內膜腺癌細胞；HEC-1-B-Cas9-591操作步驟 返回列表頁

Cas9穩定表達的人子宮內膜腺癌細胞；HEC-1-B-Cas9-591操作步驟操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內，吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量*，使*的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*，加入新鮮培養基，晃動細胞瓶，終止*作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養基，置37℃溫箱培養，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉移到無菌離心管內，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養基，置37℃溫箱培養。

細胞名稱   Cas9穩定表達的人子宮內膜腺癌細胞；HEC-1-B-Cas9-591操作步驟
形態特性 上皮樣

生長特性 貼壁生長

特征特性 該細胞是采用慢病毒感染的方式使HEC-1B細胞穩定表達Cas9-Flag-Puromycin，經2ug/ml嘌呤霉素篩選得到的單克隆，經Western Blotting驗證該克隆可以表達Cas9蛋白，可直接用Crispr技術編輯基因組DNA。

培養條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS；2ug/ml Puromycin

傳代方法 消化3-5分鐘；1:2傳代；3天內可長滿。

傳代情況 C3

凍存條件 *培養基+8%DMSO

支原體檢測 陰性

STR Amelogenin：x,x；CSF1PO：10,12；D12S391：18,19；D13S317：11,11；D16S539：11,12；D18S51：16,20；D19S433：13,13；D21S11：30,31；D2S1338：18,19；D3S1358：15,15；D5S818：11,13；D6S1043：12,18；D7S820：9,11；D8S1179：13,14；FGA：21,21；Penta E：11,11；TH01：6,7；TPOX：8,11；vWA：18,18；

同工酶

染色體

使用權限 A類

Cas9穩定表達的人子宮內膜腺癌細胞；HEC-1-B-Cas9-591操作步驟細胞培養
1、冷凍管應如何解凍？
取出冷凍管后， 須立即放入37 ℃水槽中快速解凍， 輕搖冷凍管使其在1 分鐘內全部融化， 并注意水面不可超過冷凍管蓋沿， 否則易發生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時， 必須注意安全， 預防冷凍管之爆裂。
2、細胞冷凍管解凍培養時， 是否應馬上去除DMSO？
除少數特別注明對DMSO 敏感之細胞外， 絕大部分細胞株（包括懸浮性細胞）， 在解凍之后， 應直接放入含有10-15ml新鮮培養基之培養角瓶中， 待隔天再置換新鮮培養基以去除DMSO 即可， 如此可避免大部分解凍后細胞無法生長或貼附之問題。
3、可否使用與原先培養條件不同之培養基？
不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養基， 若驟然使用和原先提供之培養條件不同之培養基， 細胞大都無法立即適應， 造成細胞無法存活。
4、可否使用與原先培養條件不同之血清種類？
不能。血清是細胞培養上一個極為重要的營養來源， 所以血清的種類和品質對于細胞的生長會產生*的影響。來自不同物種的血清， 在一些物質或分子的量或內容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
人結腸平滑肌細胞RNAHCSMC miRNA5 μg

TNFRSF13C Others Mouse 小鼠 BAFFR / TNFRSF13C / CD268 人細胞裂解液 (陽性對照)

GIST 人胃腸道間質瘤細胞

CL-0434SC-1(小鼠胚胎細胞)5×106cells/瓶×2

人少突膠質細胞

人胚肺細胞VA13細胞;WI-38 VA13亞系2RA 人直結腸平滑肌細胞*培養基 100mL
CD44 Others Human 人 CD44 人細胞裂解液 (陽性對照)

CL-0464USMC(大鼠血管平滑肌細胞)5×106cells/瓶×2

人肝內膽管上皮細胞RNAHIBEpiC miRNA5 μg

5637(HTB-9)細胞，人膀胱癌細胞 大鼠肝癌細胞(癌細胞接種到肝臟成瘤),Walker-256細胞 MLF, 小鼠淋巴成纖維細胞

HO-8910PM(人高轉移卵巢癌細胞) 5×106cells/瓶×2

hMSC-AT-c 人類脂肪組織間質干細胞(hMSC-AT) 500,000cells 小鼠背脊髓神經元MN-dsc
CL-0464USMC(大鼠血管平滑肌細胞)5×106cells/瓶×2

CD44 Others Human 人 CD44 人細胞裂解液 (陽性對照)

人肝內膽管上皮細胞RNAHIBEpiC miRNA5 μg

5637(HTB-9)細胞，人膀胱癌細胞 大鼠肝癌細胞(癌細胞接種到肝臟成瘤),Walker-256細胞 MLF, 小鼠淋巴成纖維細胞

HO-8910PM(人高轉移卵巢癌細胞) 5×106cells/瓶×2

hMSC-AT-c 人類脂肪組織間質干細胞(hMSC-AT) 500,000cells 小鼠背脊髓神經元MN-dsc
化鈉三糖鐵250用于副溶血性弧菌的生化反應篩選(SN標準)incubationmedia化鈉三糖鐵250用于副溶血性弧菌的生化反應篩選(SN標準)  進口分裝  腺苷；腺嘌呤核苷  Adenosine  號：  58-61-7  質量規格：  BR,>99%,細胞培養級

改良綠色酵母菌和真菌肉湯250用于飲料中真菌及酵母菌檢測(Acumedia方法)incubationmedia改良綠色酵母菌和真菌肉湯250用于飲料中真菌及酵母菌檢測(Acumedia方法)  進口分裝  *（標準品）  At
人血管性血友病因子elisa試劑盒  進口分裝  補骨脂寧;補骨脂異黃  Corylin  號：  53947-92-5  質量規格：  HPLC≥98%，標準品

人血管舒緩激肽elisa試劑盒  進口分裝  補骨脂素（標準品）  Psoralen  號：  66-97-7  質量規格：  HPLC≥98%，標準品

人血管生長素elisa試劑盒  進口分裝  蒼術素（標準品）  Atractylodin  號：  55290-63-6  質量規格：  HPLC≥98%，標準品

人血管生成素樣蛋白3elisa試劑盒  進口分裝  *（標準品）  Bulley A  號：  107668-79-1  質量規格：  HPLC≥98%，標準品
Cas9穩定表達的人子宮內膜腺癌細胞；HEC-1-B-Cas9-591操作步驟總蛋白（雙縮脲或考馬斯亮蘭）檢測  進口分裝  22681-72-7  Danshensu  C9H10O5  198.17  Phenylpropanoids  >=98%  20mg

（半自動/手工）  進口分裝  42719-32-4  Pedunculoside  C36H58O10  650.84  Triterpenoids  >=98%  20mg

諾沃克病毒熒光定量  進口分裝  486-86-2  N-Methylcytisine  C12H16N2O  204.27  Alkaloids  >=98%  20mg

高純度革蘭氏陽性菌質粒中量提取試劑盒  進口分裝  4431-01-0  Ligustilide  C12H14O2  190.24  Miscellaneous  >=98%  20mg

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