EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞；KMY1008實驗方法 返回列表頁

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞；KMY1008實驗方法操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量*，使*的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細胞瓶，終止*作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

細胞名稱   EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞；KMY1008實驗方法
形態(tài)特性 淋巴母細胞樣

生長特性 懸浮生長

特征特性 該細胞系來源于一成年男性的外周血。2010年由中科院昆明細胞庫通過EB病毒轉(zhuǎn)化的方法建立。

培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS

傳代方法 1:2傳代；5-6天一次

傳代情況 P2

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

支原體檢測 熒光法（-）

STR -

同工酶

染色體

使用權(quán)限 A類

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞；KMY1008實驗方法細胞培養(yǎng)
1、冷凍管應如何解凍？
取出冷凍管后， 須立即放入37 ℃水槽中快速解凍， 輕搖冷凍管使其在1 分鐘內(nèi)全部融化， 并注意水面不可超過冷凍管蓋沿， 否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時， 必須注意安全， 預防冷凍管之爆裂。
2、細胞冷凍管解凍培養(yǎng)時， 是否應馬上去除DMSO？
除少數(shù)特別注明對DMSO 敏感之細胞外， 絕大部分細胞株（包括懸浮性細胞）， 在解凍之后， 應直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中， 待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可， 如此可避免大部分解凍后細胞無法生長或貼附之問題。
3、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？
不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基， 若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基， 細胞大都無法立即適應， 造成細胞無法存活。
4、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？
不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源， 所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生*的影響。來自不同物種的血清， 在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
小鼠垂體瘤細胞;GT1-1

人表皮微血管內(nèi)皮細胞(HDMEC)( 5×105 )

Raji，人Burkitt's淋巴瘤細胞

人結(jié)直腸腺癌細胞;COLO 320DM [COLO320DM] 大鼠腎小管上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL

MLTC-1 小鼠間質(zhì)細胞瘤細胞

EDA2R Others Human 人 EDA2R / XEDAR / TNFRSF27 人細胞裂解液 (陽性對照)
CD8B Others Human 人 CD8B / P37 / LEU2 人細胞裂解液 (陽性對照)

CL-0167NCI-H292(人肺癌細胞)5×106cells/瓶×2

小鼠腸靜脈內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基 100mL

marc-145猴胚胎腎上皮細胞 Marc-145 monkey embryonic kidney epithelial cells DMEM+10% FBS

LIF Protein Human 重組人 LIF 蛋白 (Fc 標簽)

RK1(大鼠腎細胞) 5×106cells/瓶×2 786-0(腎透明細胞腺癌)
CL-0167NCI-H292(人肺癌細胞)5×106cells/瓶×2

CD8B Others Human 人 CD8B / P37 / LEU2 人細胞裂解液 (陽性對照)

小鼠腸靜脈內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基 100mL

marc-145猴胚胎腎上皮細胞 Marc-145 monkey embryonic kidney epithelial cells DMEM+10% FBS

LIF Protein Human 重組人 LIF 蛋白 (Fc 標簽)

RK1(大鼠腎細胞) 5×106cells/瓶×2 786-0(腎透明細胞腺癌)
人11去氫血栓烷B2elisa試劑盒  進口分裝  4,4''-二溴對三聯(lián)苯(>95.0%(GC))  4,4''-Dibromo-p-terphenyl  號：  17788-94-2  質(zhì)量規(guī)格：  >95.0%(GC)

人維生素D2elisa試劑盒  進口分裝  酞菁銅(II)(α-型)(>90.0%(T))  Copper(II) Phthalo (α-form)  號：  147-14-8  質(zhì)量規(guī)格：  >90.0%(T)

人戊型肝炎病毒IgGelisa試劑盒  進口分裝  喹吖啶
緩沖動力-鹽培養(yǎng)基  進口分裝  乙酸鈉三水(分子生物學級)  Sodium acetate, trihydrate  號：  6131-90-4  質(zhì)量規(guī)格：  >99%,分子生物學級

動力—鹽培養(yǎng)基(A法)  進口分裝  脫葉靈,噻苯隆  Thidiazuron  號：  51707-55-2  質(zhì)量規(guī)格：  >98%,分子生物學級

明膠培養(yǎng)基(營養(yǎng)明膠)100g供測定細菌液化明膠使用  進口分裝  (AR)    號：    質(zhì)量規(guī)格：  >99.5%,AR

克氏雙糖鐵瓊脂  進口分裝  乙醇脫氫酶  ADA, Alcohol dehydrogenase   號：  9031-72-5  質(zhì)量規(guī)格：  >300U/mg,BR
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞；KMY1008實驗方法溴化十六烷基*銨瓊脂培養(yǎng)基  進口分裝  Desmethoxy Ranol-d5  中文名稱：  去甲氧基ranol-d5  編號：    分子結(jié)構(gòu)式：  C23H26D5N3O3

十六烷*基*培養(yǎng)基  進口分裝  Manidipine-d4  中文名稱：  manidipine-d4  編號：    分子結(jié)構(gòu)式：  C35H34D4N4O6

SCDLP液體培養(yǎng)基  進口分裝  2’,3’-O-Isopropylidene-1-α-D-ribofuranosyl-1,2,4-triazole-3-carboxylic Acid Methyl Ester 5’-O-Acetate  中文名稱：  2’，3’- o-isopropylidene-1 -α- d-ribofuranosyl-1,2,4-triazole-3-carboxylic酸甲酯5 - o-acetat  編號：    分子結(jié)構(gòu)式：  C14H19N3O7

TSA胰蛋白胨大豆瓊脂培養(yǎng)基(大豆消化酪素瓊脂培養(yǎng)基)  進口分裝  4-Hydrazinobenzoic Acid-d4 Hydrochloride  中文名稱：  4-hydrazinobenzoic acid-d4鹽酸鹽  編號：  1246816-67-0  分子結(jié)構(gòu)式：  C7H5D4ClN2O2

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