EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞；KM933實(shí)驗(yàn)方法 返回列表頁(yè)

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞；KM933實(shí)驗(yàn)方法操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，加入適量*，使*的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去*，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止*作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

細(xì)胞名稱   EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞；KM933實(shí)驗(yàn)方法
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣

生長(zhǎng)特性 懸浮生長(zhǎng)

特征特性 該細(xì)胞來(lái)源于一正常女性的外周血。1993年由*昆明細(xì)胞庫(kù)通過(guò)EB病毒轉(zhuǎn)化的方法建立。

培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS

傳代方法 1:2傳代；5-6天一次

傳代情況 P5

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

支原體檢測(cè) 熒光法（-）

STR -

同工酶

染色體

使用權(quán)限 A類

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞；KM933實(shí)驗(yàn)方法細(xì)胞培養(yǎng)
1、冷凍管應(yīng)如何解凍？
取出冷凍管后， 須立即放入37 ℃水槽中快速解凍， 輕搖冷凍管使其在1 分鐘內(nèi)全部融化， 并注意水面不可超過(guò)冷凍管蓋沿， 否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí)， 必須注意安全， 預(yù)防冷凍管之爆裂。
2、細(xì)胞冷凍管解凍培養(yǎng)時(shí)， 是否應(yīng)馬上去除DMSO？
除少數(shù)特別注明對(duì)DMSO 敏感之細(xì)胞外， 絕大部分細(xì)胞株（包括懸浮性細(xì)胞）， 在解凍之后， 應(yīng)直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中， 待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可， 如此可避免大部分解凍后細(xì)胞無(wú)法生長(zhǎng)或貼附之問(wèn)題。
3、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？
不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基， 若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基， 細(xì)胞大都無(wú)法立即適應(yīng)， 造成細(xì)胞無(wú)法存活。
4、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？
不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源， 所以血清的種類和品質(zhì)對(duì)于細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生*的影響。來(lái)自不同物種的血清， 在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯(cuò)誤常會(huì)造成細(xì)胞無(wú)法存活。
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0909

人口腔角質(zhì)細(xì)胞(HOK)( 5×105 )

CL-0407NCTC 1469(小鼠正常肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

人肺鱗癌細(xì)胞;NCI-H520 大鼠冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

C6 大鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞

HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Duck/Hong Kong/p46/97) HA 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
IgG4 Others Human 人 IgG4-Fc (108 Ser/Pro) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

CL-0095HCCC-9810(人肝內(nèi)膽管癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

小鼠肝星形細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

H322人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 H322 cells in human non small cell lung cancer DMEM+10% FBS

OSM Protein Human 重組人 Oncostatin M / OSM 蛋白 (His 標(biāo)簽)

RWPE-2(人前列腺正常細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CHRF(人巨核細(xì)胞白血病)
CL-0095HCCC-9810(人肝內(nèi)膽管癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

IgG4 Others Human 人 IgG4-Fc (108 Ser/Pro) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

小鼠肝星形細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

H322人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 H322 cells in human non small cell lung cancer DMEM+10% FBS

OSM Protein Human 重組人 Oncostatin M / OSM 蛋白 (His 標(biāo)簽)

RWPE-2(人前列腺正常細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CHRF(人巨核細(xì)胞白血病)
LIM培養(yǎng)基  進(jìn)口分裝  草毒死（標(biāo)準(zhǔn)品）   Allidochlor  號(hào)：  93-71-0  質(zhì)量規(guī)格：  分析標(biāo)準(zhǔn)品

草酸鉀兔血漿0.2ml*20用于溶血性鏈球菌的檢驗(yàn)  進(jìn)口分裝  鉻標(biāo)準(zhǔn)溶液（100µg/mL,基體：水）  Chromium solution  號(hào)：  7440-47-3  質(zhì)量規(guī)格：  100µg/mL,基體：水

含225ml7.5%化鈉肉湯均質(zhì)袋10個(gè)/包用于*的選擇性增菌培養(yǎng)  進(jìn)口分裝  鉬標(biāo)準(zhǔn)溶液(100µg/mL,基體: 1%HCl)  M
緩沖MUG瓊脂BufferedMUGAgar100用于濾膜MUG法檢測(cè)食品中大腸桿菌數(shù)(SN/T1059.2)  進(jìn)口分裝  地*  Dimesna   號(hào)：  16208-51-8  質(zhì)量規(guī)格：  美國(guó)進(jìn)口

弧菌顯色培養(yǎng)基VibrioChromogenicMedium1000ml用于弧菌的顯色培養(yǎng)，副溶血性弧菌顯藍(lán)色，其它弧菌顯無(wú)色。  進(jìn)口分裝  *  Dolasetron mesylate   號(hào)：  115956-13-3  質(zhì)量規(guī)格：  >98.5%,BR

哥倫比亞血瓊脂基礎(chǔ)ColumbiaBloodAgarBase250營(yíng)養(yǎng)非常豐富，用各種細(xì)菌的基礎(chǔ)培養(yǎng)基(AFNOREPIDF標(biāo)準(zhǔn))  進(jìn)口分裝  *(標(biāo)準(zhǔn)品)  Dolasetron mesylate   號(hào)：  115956-13-3  質(zhì)量規(guī)格：  HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品

哥倫比亞MUG培養(yǎng)基Columbia-MUGMedium250用于大腸桿菌的熒光檢測(cè)(SN標(biāo)準(zhǔn))  進(jìn)口分裝  鹽酸*  Doxepin HCl   號(hào)：  1229-29-4  質(zhì)量規(guī)格：  >99%,BP2008,BR
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞；KM933實(shí)驗(yàn)方法人垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽elisa試劑盒  進(jìn)口分裝  1-基(>98.0%(GC)(T))  1-Aminoe  號(hào)：  610-49-1  質(zhì)量規(guī)格：  >98.0%(GC)(T)

人干擾素調(diào)節(jié)因子3elisa試劑盒  進(jìn)口分裝  1,3,3-*基吲哚-奈諤嗪(>98.0%(HPLC)(T))  1,3,3-Trimethylindolinonaphthospiroox [Photochromic Compound]  號(hào)：  27333-47-7  質(zhì)量規(guī)格：  >98.0%(HPLC)(T)

人白三烯D4elisa試劑盒  進(jìn)口分裝  4-溴-4'-庚基聯(lián)苯(>97.0%(GC))  4-Bromo-4'-heptylbiphenyl  號(hào)：  58573-93-6  質(zhì)量規(guī)格：  >97.0%(GC)

人肌球蛋白輕鏈激酶elisa試劑盒  進(jìn)口分裝  4-芐氧基苯甲(>98.0%(GC))  4-Benzyloxybenzonitrile  號(hào)：  52805-36-4  質(zhì)量規(guī)格：  >98.0%(GC)

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞；KM933實(shí)驗(yàn)方法現(xiàn)貨直銷，免費(fèi)快遞送貨上門。公司供應(yīng)各種細(xì)胞株，細(xì)胞系，種類齊全，現(xiàn)貨，質(zhì)量保證，公司所有產(chǎn)品僅供科研使用，不得用于醫(yī)學(xué)診斷。使用前仔細(xì)閱讀本說(shuō)明書。