海洋微生物菌種樣品的處理方法

海洋微生物菌種樣品的處理方法
1、  血清
血清是zui常用于ELISA檢測(cè)的一類樣本，處理也比較簡(jiǎn)單。
用無熱原、無內(nèi)毒素的試管或離心管采集血液標(biāo)本，將試管或離心管室溫放置2小時(shí)或4℃一個(gè)晚上，使血清析出。（將試管或離心管傾斜放置，使液面橫截面增大，能使血清更大程度的析出。）4℃ 1000×g離心20分鐘，仔細(xì)收集上清。建議將血清分裝多份，-20℃或-80℃保存，避免反復(fù)凍融。
采血過程中應(yīng)避免溶血，因?yàn)榧t細(xì)胞裂解時(shí)會(huì)釋放具有過氧化酶活性的物質(zhì)，在以HRP為標(biāo)記的ELISA檢測(cè)中會(huì)有非特異性的顯色，而導(dǎo)致檢測(cè)的不準(zhǔn)確性。同時(shí)也應(yīng)避免細(xì)菌污染，因?yàn)榫w內(nèi)可能含有內(nèi)源性的HRP從而導(dǎo)致檢測(cè)的假陽(yáng)性。
2、  血漿
用含抗凝劑的*或離心管采集血液標(biāo)本，標(biāo)本采集后30min內(nèi)4℃ 1000×g離心15min，取上清即血漿。將上清分裝多份，-20℃或-80℃保存，避免反復(fù)凍融。避免使用溶血或高血脂的標(biāo)本。
常用的抗凝劑為EDTA、*和*等，檢測(cè)時(shí)還應(yīng)仔細(xì)閱讀試劑盒說明書，檢查試劑盒是否對(duì)抗凝劑有特殊要求。
3、  細(xì)胞培養(yǎng)上清
取細(xì)胞培養(yǎng)上清到離心管，1000×g離心20min，除去細(xì)胞碎片及雜質(zhì)，取上清，-20℃或-80℃保存，避免反復(fù)凍融。
4、  細(xì)胞裂解液
1）  吸去培養(yǎng)板內(nèi)的培養(yǎng)基，用*消化細(xì)胞，加適量培養(yǎng)基將細(xì)胞從培養(yǎng)板上吹下來。懸浮細(xì)胞可省略。
2）  收集細(xì)胞懸液，1000×g離心10min，棄去培養(yǎng)基，用預(yù)冷的PBS潤(rùn)洗3次。
3）  加入適量的預(yù)冷PBS或細(xì)胞裂解液（臨用前加入蛋白酶抑制劑）重懸細(xì)胞。通常6孔板一個(gè)孔的細(xì)胞量需要150~250μL PBS重懸。
4）  將樣品放入-20℃或-80℃，使樣品冷凍，再放室溫解凍樣品，反復(fù)凍融幾次，使細(xì)胞充分裂解。也可將樣品進(jìn)行超聲破碎，以達(dá)到裂解的目的。
5）  4℃ 10000×g 離心10min，除去細(xì)胞碎片，取上清，-20℃或-80℃保存，避免反復(fù)凍融。
5、組織勻漿液
1）  將組織樣本用PBS (0.01錨點(diǎn)錨點(diǎn)M, PH 7.4) 沖洗，洗去組織表面殘留的血液或雜質(zhì)。
2）  將組織塊稱重，記錄后剪碎，碎塊應(yīng)盡量小，便于勻漿得更充分
3）  將組織按一定的比例加入預(yù)冷的PBS（臨用前加入蛋白酶抑制劑）勻漿，勻漿時(shí)置于冰上或冰浴中。（通常按組織重量：PBS體積=1:9的比例勻漿，例如1g的組織樣本對(duì)應(yīng)9mL的PBS，具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整，檢測(cè)后計(jì)算樣品濃度時(shí)應(yīng)乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)）
4）  吸取勻漿液到離心管，4℃ 5000×g 離心5~10min，取上清，-20℃或-80℃保存，避免反復(fù)凍融。
6、  尿液、唾液等其他液體生物樣本
1000×g離心20min，取上清即可檢測(cè)。
海洋微生物菌種綿羊孕激素/孕酮(PROG)ELISA Kit    英文名：    Sheep Progesterone,PROG ELISA Kit
綿羊游離三碘甲狀腺原氨酸(Free-T3)ELISA Kit    英文名：    Sheep free tri-iodothyronine indes,FT3 ELISA kit
綿羊游離甲狀腺素(FT4)ELISA Kit    英文名：    Sheep free thyroxine,FT4 ELISA kit
綿羊胰島素樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)ELISA Kit    英文名：    Sheep insulin-like growth factor 1,IGF-1 ELISA Kit
綿羊胰島素(INS)ELISA Kit    英文名：    Sheep Insulin,INS ELISA Kit
綿羊血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA Kit    英文名：    Sheep Serum Amyloid A,SAA ELISA Kit
綿羊血管生成素2(ANG-2/ANGPT2)ELISA Kit    英文名：    Sheep angiopoietin 2,ANG-2/ANGPT2 ELISA kit
綿羊褪黑素(MT)ELISA Kit    英文名：    Sheep Melatonin,MT ELISA Kit
綿羊銅藍(lán)蛋白(CP)ELISA Kit    英文名：    Sheep Ceruloplasmin,CP ELISA Kit
綿羊甜菜堿-同型半*S-甲基轉(zhuǎn)移酶1(BHMT)ELISA Kit    英文名：    Sheep Betaine--homocysteine S-methyltransferase 1,BHMT ELISA kit
綿羊髓過氧化物酶(MPO)ELISA Kit    英文名：    Sheep myeloperoxidase,MPO ELISA kit
綿羊雙氫睪酮(DHT)ELISA Kit    英文名：    Sheep Dihydrotestosterone,DHT ELISA Kit
綿羊生長(zhǎng)激素(GH)ELISA Kit    英文名：    Sheep Somatotropin,GH ELISA kit
綿羊三碘甲狀腺原氨酸(T3)ELISA Kit    英文名：    Sheep tri-iodothyronine(T3)ELISA kit
綿羊*(LZM)ELISA Kit    英文名：    Sheep Lysozyme,LZM ELISA Kit
綿羊熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA Kit    英文名：    Sheep heat shock protein 70,HSP-70 ELISA
綿羊皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CORT)ELISA Kit    英文名：    Sheep corticosterone,CORT ELISA kit
綿羊*(Cortisol)ELISA Kit    英文名：    Sheep Cortisol ELISA Kit
綿羊內(nèi)皮素1受體(EDNRA)ELISA Kit    英文名：    Sheep Endothelin-1 receptor,EDNRA ELISA ki
綿羊繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管激素(MIS/AMH)ELISA Kit    英文名：    Sheep Mullerian Inhibiting Substance/Anti-Mullerian hormone,MIS/AMH ELISA Kit
綿羊免疫球蛋白M(IgM)ELISA Kit    英文名：    Sheep Immunoglobulin M,IgM ELISA Kit
綿羊免疫球蛋白G(IgG)ELISA Kit    英文名：    Sheep Immunoglobulin G,IgG ELISA Kit
綿羊免疫球蛋白E(IgE)ELISA Kit    英文名：    Sheep Immunoglobulin E,IgE ELISA Kit
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