海洋微生物菌種操作方法

海洋微生物菌種操作方法
1、直接法免疫血清的制備
取體重2～3Kg的雄雞1只，免疫前采血8～10mL，測其正常抗體。靜脈注射新城疫弱毒新鮮尿囊液病毒2mL，同時(shí)腹腔注射8mL，2～4d后同法再免疫一次。第二次免疫后七天試血，血清凝集價(jià)在1︰320以上為合格即可全采血；如果不合格，可在第二次免疫后10d左右，用同法再免疫一次，一般都可獲得價(jià)的免疫血清。制備抗病血血清時(shí)。抗原量要大，間隔日期要短。
2、免疫球蛋白抗血清制備方法
此法用于制備間接法抗抗體。因抗原為可溶性，故多需加佐劑。
（1）淋巴結(jié)注射法
1）選擇體重2～3Kg的健康雄性家兔（ 2只以上），編號(hào)；
2）在家兔兩后腳掌共注射活卡介苗，50mg（約0.6mL．每只足庶部皮下0.1mL，皮內(nèi)0.2mL）。7～10d后，鼠或國窩處淋巴結(jié)腫大如黃豆或蠶豆大小；
3）用二指固定腫大之淋巴結(jié)，兩側(cè)淋巴結(jié)各注射加有*佐劑的抗原o．5mL，共1mL。事先將抗原稀釋為 5～10mg/ml，在免疫前一日加入青、*，使青、*的濃度分別為1000U/mL和1000mg／mL。4℃過夜，次日取出與佐劑混合成乳劑。許多單位用兩個(gè)注射器分別吸取佐劑與抗原，中間用細(xì)膠管連接，相互推進(jìn)若干次，達(dá)到乳化目的；
4）10～14d后，于兩側(cè)淋巴結(jié)各注射加有*佐劑的抗原0.25～0.5mL（這一次也可以省略）；
5）7d后，于兩側(cè)淋巴結(jié)各注射加有不*佐劑的抗原0.25～0.5mL；
6）試血：第三次免疫后7～10d，耳靜脈取少量血，分離血清，用雙擴(kuò)散法，中間孔加抗原（1mg/mL），周圍孔加不同稀釋度的待檢抗血清，37℃、 24h，觀察結(jié)果，效價(jià)在1︰16以上，或者中間孔加抗血清，周圍孔加不同稀釋倍數(shù)的抗原。效價(jià)達(dá)4000倍以上即可應(yīng)用；
7）放血：效價(jià)合格后即可放血。放血前停食12h。動(dòng)物仰臥固定，頸部剪毛消毒，切開皮膚lOcm，找到頸動(dòng)脈，將頸動(dòng)脈和迷走神經(jīng)剝離。選擇血管中段，用兩*夾住（約 5cm），切開，放血（2500g重家兔可放血lOOmL）；
8）分離血清：血液放于大試管、平皿或三角瓶中，凝固后，用鉑耳或無菌滴管沿邊緣剝離，先故37122h，再放4℃過夜，使血清充分析出。離心沉淀，鑒定合格，冰箱保存?zhèn)溆谩！?br />海洋微生物菌種小鼠磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PCK)ELISA Kit    英文名：    Mouse phosphoenolpyruvate carboxykinase,PCK ELISA Kit
小鼠磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(pAMPK)ELISA Kit    英文名：    Mouse Phosphorylated Adenosine Monophosphate Activated Protein Kinase, pAMPK ELISA Kit
小鼠磷酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(pERK)ELISA Kit    英文名：    Mouse phospho-extracellular signal-regulated kinase,pERK ELISA Kit
小鼠磷酸化*蛋白激酶JAK3(pJAK3)ELISA Kit    英文名：    Mouse phosphorylated tyrosine-protein kinase JAK3,pJAK3 ELISA kit
小鼠磷酸化核因子-κB(p-NF-κB)ELISA Kit    英文名：    Mouse phosphor-nuclear factor kappa B,p-NF-κB ELISA Kit
小鼠磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)ELISA Kit    英文名：    Mouse phospho Protein Kinase C,P-PKC ELISA Kit
小鼠磷酸化蛋白激酶B(P-PKB)ELISA Kit    英文名：    Mouse phosphorylated protein kinase B,P-PKB ELISA Kit
小鼠磷酸化表皮生長因子受體(pEGFR)ELISA Kit    英文名：    Mouse phosphorylated epidermal growth factor receptor,pEGFR ELISA kit
小鼠磷酸化氨基末端蛋白激酶(P-JNK)ELISA Kit    英文名：    Mouse phosphorylated c-Jun N-terminal kinase,P-JNK ELISA kit
小鼠*腦啡肽(Leu-ENK)ELISA Kit    英文名：    Mouse Leu-Enkephalin,Leu-ENK ELISA Kit
小鼠鏈球菌(SK)抗體(IgG)ELISA Kit    英文名：    Mouse streptococcal(SK)antibody(IgG)ELISA kit
小鼠*羥化酶(TH)ELISA Kit    英文名：    Mouse tyrosine hydroxylase,TH ELISA Kit
小鼠跨膜蛋白97(TMEM97/MAC30)ELISA Kit    英文名：    Mouse Transmembrane protein 97,TMEM97/MAC30 ELISA Kit
小鼠可溶性腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(sTRAIL)ELISA Kit    英文名：    Mouse soluble tumor necrosis factor-related apoptosis inducing ligand,sTRAIL ELISA KIT
小鼠可溶性血栓調(diào)節(jié)蛋白(sTM)ELISA Kit    英文名：    Mouse Soluable Thrombomodulin,sTM ELISA Kit
小鼠可溶性髓系細(xì)胞觸發(fā)受體-1(sTREM-1)ELISA Kit    英文名：    Mouse sTREM-1 ELISA Kit
小鼠可溶性瘦素受體(sLR)ELISA Kit    英文名：    Mouse Leptin Soluble Receptor,sLR ELISA Kit
小鼠可溶性凝集素樣氧化低密度脂蛋白受體1(sLOX-1)ELISA Kit    英文名：    Mouse soluble Lectin-like Oxidized Low Density Lipoprotein Receptor-1(sLOX-1)ELISA Kit
小鼠可溶性肌球蛋白重鏈2(sMHC-2)ELISA Kit    英文名：    Mouse soluble myosin heavy chain 2,sMHC-2 ELISA Kit
小鼠可溶性肌球蛋白重鏈1(sMHC-1)ELISA Kit    英文名：    Mouse soluble myosin heavy chain 1,sMHC-1 ELISA Kit海洋微生物菌種