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    蝦肝腸微胞蟲探針法熒光定量PCR試劑盒數據處理分析

    時間:2020/4/14閱讀:512
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    蝦肝腸微胞蟲探針法熒光定量PCR試劑盒數據處理

    1. 如果把本試劑盒用于定量檢測,則以陽性對照濃度的 log 值為橫軸,以 Ct值為縱軸,繪制標準曲線。再以待測樣品的 Ct 值從標準曲線上推算出樣品RNA 濃度的 log 值,再推算出其濃度。

    2. 如果把本試劑盒用于定性檢測,只判斷陽性或陰性,則陰性對照 Ct 必須大于或等于 40。陽性對照必須有熒光對數增長,有典型擴增曲線,Ct 值應該小于或等于 30。對待測樣品,如果其 Ct 大于或等于 40 則為陰性,如果小于或等于 35 則為陽性。如果在 35-40 之間,則重復一次。重復實驗的 Ct值如果大于或等于 40 則為陰性,如果小于 35,則為陽性。

    注意事項:
    建議加樣順序是陰性質控品、待檢樣本、陽性質控品。4. PCR擴增(擴增區)
    1)     儀器設置(以ABI Prism 7500為例)
    將PCR反應管放入PCR儀內,按照對應順序設置陰性質控品(NTC)、陽性質控品(Standard)及待檢樣本(Unknown)。Reporter Dye為FAM,Quencher Dye為None,參比染料(Passive Reference)為None。
    2 )   擴增程序

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