其它elisa免疫檢測試劑盒感受態細胞制備/轉化

1. 其它elisa免疫檢測試劑盒成長狀況和密度: 不要用通過屢次轉接或儲于4℃的培育的細菌,從－70℃或-20℃甘油保管的菌種中直接轉接用于制備感受態細胞的菌液.細胞成長密度以剛進入對數成長期時為好,可通過監測培育液的OD600 來操控.DH5α菌株的OD600 為0.5時, 細胞密度在5×107 個/ml左右（不一樣的細菌狀況有所不一樣）,這時對比適宜.密度過高或缺乏均會影響轉化功率.
2. 質粒的質量和濃度: 用于轉化的質粒DNA應主要是超螺旋態DNA（cccDNA）.轉化功率與外源DNA的濃度在必定范圍內成正比,但當參加的外源DNA的量過多或體積過大時,轉化功率就會下降.1ng的cccDNA即可使50μl 的感受態細胞到達飽滿.通常狀況下,DNA溶液的體積不該超越感受態細胞體積的5％.
3. 試劑的質量: 所用的試劑,如CaCl2 等均需是Z高純度的（GR.或AR.）,并用超純水制造,分裝保管于枯燥的冷暗處.
4. 避免雜菌和雜DNA的污染：整個操作進程均應在無菌條件下進行, 所用器皿, 如離心管, tip*是新的,并經高壓滅菌處置,一切的試劑都要滅菌,且注意避免被其它試劑、DNA酶或雜DNA所污染, 不然均會影響轉化功率或雜DNA的轉入, 為今后的挑選、判定帶來不必要的費事.
本試驗以E.coli DH菌株為受體細胞,并用CaCl2處置,使其處于感受態,然后與pBS質粒共保溫,完成轉化.因為pBS質粒帶有氨芐*抗性基因（Ampr ）,其它elisa免疫檢測試劑盒可通過Amp抗性來挑選轉化子.如受體細胞沒有轉入pBS,則在含Amp的培育基上不能成長.能在Amp培育基上成長的受體細胞（轉化子）必定已導入了pBS.轉化子擴增后,可將轉化的質粒提取出,進行電泳、酶切等進一步判定.
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