ATCC細胞培養領域

一、ATCC細胞無血清培養基的基本配方:基本成分為基礎培養基及添加組分兩大部分。 
    用于生物制藥和疫苗生產的細胞在體外培養時，多數呈貼壁生長或兼性貼壁生長；而當其在無血清、無蛋白培養基中生長時，由于缺乏血清中的各種粘附貼壁因子如纖粘連蛋白、層粘連蛋白、膠原、玻表粘連蛋白，細胞往往以懸浮形式生長。 
添加組分包括以下幾大類物質
(1）促貼壁物質：許多細胞必須貼壁才能生長，這種情況下無血清培養基中一定要添加促貼壁和擴展因子，一般為細胞外基質，如纖連蛋白、層粘連蛋白等。它們還是重要的分裂素以及維持正常細胞功能的分化因子，對許多細胞的繁殖和分化，起著重要作用。纖連蛋白主要促進來自中胚層細胞的貼壁與分化，這些細胞包括成纖維細胞、肉瘤細胞、粒細胞、腎上皮細胞、腎上腺皮質細胞、CHO細胞、成肌細胞等。 
(2）促生長因子及激素：針對不同細胞添加不同的生長因子。激素也是刺激細胞生長、維持細胞功能的重要物質，有些激素是許多細胞*的，如胰島素。 
(3）酶抑制劑：培養貼壁生長的細胞，需要用*消化傳代，在無血清培養基中*須含酶抑制劑，以終止酶的消化作用，達到保護細胞的目的。zui常用的是大豆*；抑制劑。 
(4）結合蛋白和轉運蛋白：常見如轉鐵蛋白和牛血清白蛋白。牛血清白蛋白的添加比較大，可增加培養基的粘度，保護細胞免受機械損傷。許多旋轉式培養的無血清培養基都含有牛血清白蛋白。 
(5)微量元素：硒是zui常見的。 
二、使用方法:目前，血清仍是動物細胞培養中zui基本的的添加物，尤其是在原代培養或者細胞生長狀況不良時，常常會先使用有血清的培養液進行培養，待細胞生長旺盛以后，再換成無血清培養液。細胞轉入無血清培養基培養要有一個適應過程，一般要逐步降低血清濃度，從10%減少到5%，3%，1%，直至無血清培養。在降低過程中要注意觀察細胞形態是否發生變化，是否有部分細胞死亡，存活細胞是否還保持原有的功能和生物學特性等。在實驗后這些細胞一般不再繼續保留，很少有細胞能夠*培養于無血清培養基而不發生改變的。細胞轉入無血清培養之前，要留有種子細胞，種子細胞按常規培養于含血清的培養基中，以保證細胞的特性不發生變化。 
為了使ATCC細胞適應無血清培養，關鍵的是使所培養細胞： 
●處于對數生長中期 
●>90% 活細胞率 
●適應時以較高的起始細胞接種 
130512-200201    100mg    含量測定    *酯    2-8℃，避光
130514-200401    100mg    HPLC法含量測定    米諾環素    2-8℃，避光
130515-200502    50mg    系統適應性    *C1a    2-8℃，避光
130517-200802    100mg    含量測定    *    2-8℃，避光
130519-200802    200mg    含量測定    *    2-8℃，避光
130520-200902    100mg    含量測定    *    2-8℃，避光
130522-200301    100mg    系統適應性    N-氧化*    2-8℃，避光
130523-200702    100mg    含量測定    *    2-8℃，避光
130524-200903    100mg    含量測定    頭孢吡肟    2-8℃，避光
ATCC細胞