人源細胞培養的注意事項大總結

人源細胞在單純的基礎培養基中不能存活，在特殊類型的細胞培養中必須提供某些痕量營養物質及生長因子才能使細胞得以生長并維持生長狀態。基礎培養基常常要添加血清，血清終濃度多為5~20%。特殊用途的血清來源須用經驗確定，廣泛應用的血清種類有馬血清與胎牛血清。胎牛血清中富含有絲分裂因子，常選其作增殖細胞用的血清，也用于細胞系和原代培養。而馬血清常常用來作有絲分裂后的神經元培養。然而，很多人也將胎牛血清用于神經元培養，也有人用馬血清來培養膠質細胞。用大鼠進行神經元培養的某些研究者喜歡使用同型血清;人類的胎盤血清，亦曾用于神經組織的器官類型的培養，也用在一些特殊培養種類中。

血清的不同批號含有不同的成分，所以許多人發現，應該在使用前對血清進行測試。大多數試劑商提供樣品，所滿意的批號即可選用，這樣可以一次得到足夠一年用量的血清，血清在使用前通常在56℃加熱30分鐘，這一過程稱為滅活。

1979年神經細胞培養出現了一個重要進展，用化學添加劑即可維持神經細胞存活與生長而不需要在培養基中添加血清。其工作基礎是用合適的激素、營養物和促貼壁的物質的組合置換培養基中的成分，zui后找到了適合大多數細胞培養的試劑配方，該配方稱為N2，專門用于神經細胞培養，zui早是用在B104大鼠神經母細胞瘤細胞系的培養。它的基礎培養基是1：1的DMEM與H12的混合液，添加了胰島素、轉鐵蛋白、腐胺和硒。胰島素和胰島素樣生長因子對于大多數類型細胞的存活和生長有重要作用，硒是*產生的合作因子，可能有助于過氧化物和超氧化物的水解，有報道說還能防止細胞的光照損傷。隨后的其他配方如N1N3則含有較低濃度的轉鐵蛋白。

未料到的是上述配方構成的培養基可以支持神經母細胞瘤細胞系快速增殖，隨后又發展了能支持原代培養的各種神經元生長的培養基，這種培養基在許多實驗室里已取代了有血清培養。人源細胞在某些培養方案中，細胞直接進入無血清培養，這樣的培養基可以消除來自血清的不均一性。更為重要的是，它們可用來檢測生長因子以及其他促進神經元存活或生長的因子，或者用來檢測那些可保護神經元免遭環境毒物損傷的制劑。于神經元的培養基在某些培養環境中還可以減低非神經元細胞的增殖，故可使神經元純化。

[Tyr9]- β-促黑激素 (豬)    英文名稱：    [Tyr9]- β-MSH (porcine)    質量規格：    >95%,BR            號：    198281-81-1     
[Val5]-血管緊張素 II 醋酸鹽水合物    英文名稱：    [Val5]-Angiotensin II acetate salt hydrate     質量規格：    美國進口            號：    58-49-1 (non-salt)    
?8,9-脫氫雌激素酮 3-硫酸鈉鹽    英文名稱：    ?8,9-Dehydro Estrone 3-Sulfate Sodium Salt    質量規格：    美國進口            號：    61612-83-7    
1-(10,12-二十五碳二炔基)溴化吡啶鎓    英文名稱：    1-(10,12-Pentacosadiynyl)pyridinium Bromide    質量規格：                號：    94598-31-9    
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