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如何更好的做ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)標(biāo)曲

閱讀：389發(fā)布時(shí)間：2018-1-18

ELISA試劑盒試驗(yàn)標(biāo)曲做欠好是什么原因，由于剛觸摸elisa試驗(yàn)，仍是歸于新手，研討大鼠干擾素相關(guān)目標(biāo)的試驗(yàn)，做完大鼠γ干擾素ELISA試驗(yàn)后反響規(guī)范曲線的梯度都欠好。剛加完顯色劑的時(shí)分梯度還算顯著，可是顯色比較淺，跟著時(shí)刻延伸（大概6、7分鐘）今后梯度就不顯著了。停止反響后測得的值梯度就沒有了。
ELISA試劑盒試驗(yàn)標(biāo)曲做欠好是什么原因：
1、剛加完顯色劑時(shí)梯度顯著：顯色液可能是從高濃度向低濃度孔加的。
2、酶濃度太高，導(dǎo)致zui終顯色結(jié)果都是高的。
3、包被-酶標(biāo)體系不匹配或許酶標(biāo)的非特異反響太強(qiáng)，或許酶標(biāo)儀讀數(shù)規(guī)模不行，
4、樣本中有能夠催化底物的物質(zhì)，沒洗下來。
5、主張：包被、酶標(biāo)重新做梯度，先用較低的濃度把梯度探索好，然后再優(yōu)化靈敏度，zui終調(diào)出所需的靈敏度、線性規(guī)模。
6、有條件的話，能夠把酶免的蛋白體系移植到板式化學(xué)發(fā)光上，加完底物三分鐘讀數(shù)。
7、蛋白體系靈敏度夠的話，顯色十分鐘就差不多了。
8、ELISA試劑盒酶是自己標(biāo)的這種狀況的，HRP份額不要太高。

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