E抗原是從乙肝表面抗原（HBsAg）陽(yáng)性血清中發(fā)現(xiàn)的一種新抗原，他可能與乙型肝炎的傳染性有密切關(guān)系。李羽等報(bào)導(dǎo)用ELISA檢測(cè)e抗原的靈敏度比瓊脂免疫擴(kuò)散法高150—300倍。試驗(yàn)程序：
1.患者免疫球蛋白IgG（e抗體）的提取：用飽滿硫酸銨沉淀法處理上述抗體陽(yáng)性人血清所得粗提液過(guò)柱（DEAE-Cellulose）搜集IgG陽(yáng)性部分，再穿流正常人血清柱。得IgG（e抗體），濃縮為5ng/ml儲(chǔ)藏放于冰箱中。
2.酶符號(hào)IgG（e抗體）的制備：用戊二醛二步法，將10mg HRP交聯(lián)5 mg IgG（e抗體），分裝于小瓶，在低溫（-20°C）下保存。
3.ELISA對(duì)e抗原的檢測(cè):
a. IgG（e抗體）包被聚苯乙烯微量反響板，在4°C過(guò)一夜（IgG濃度為25r/ml）。
b.洗刷3-5次。
c.加待檢病員血清（1:10稀釋，每份標(biāo)本加兩孔，每孔0.1ml,37°c孵育2h）.
e.洗刷3-5次。
f.加酶符號(hào)IgG（e抗體），37°C孵育2h（酶符號(hào)IgG稀釋度為1:640）。
g.洗刷3-5次。
h.加底物與供氫體（H2O2與OPD）,置于暗處反響30min.
i.加2mol/L硫酸停止反響。
j.每板均設(shè)陽(yáng)性與陰性對(duì)照，依據(jù)不同的顯色反響予以判別。
k.通過(guò)上訴辦法檢測(cè)開(kāi)始確定為陽(yáng)性的標(biāo)本，取兩份，一份加足量的e抗體血清，另一份加正常人血清，在37°C孵育1h，然后再按上述辦法測(cè)定e抗原。加e抗原體血清者，在顯色反響受到操控（與正常血清比照）時(shí)才可判別為e抗原陽(yáng)性。
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