ELISA試劑盒試驗(yàn)前預(yù)備：
1、運(yùn)用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出，室溫放置zui少30分鐘。
2、預(yù)備各種試驗(yàn)儀器及資料，如微量移液器，吸頭，醫(yī)用蒸餾水等。
3、濃縮洗液與醫(yī)用蒸餾水1：19倍稀釋后變成運(yùn)用洗刷液。
4、濃縮樣品稀釋液與醫(yī)用蒸餾水1：4倍稀釋成運(yùn)用樣品稀釋液。
5、用運(yùn)用樣品稀釋液來(lái)稀釋樣品，按照1：100的體積比來(lái)稀釋樣品如10μl的樣品參加到1ml的運(yùn)用樣品稀釋液中，充分混勻待用。
ELISA試劑盒操作過(guò)程：
1、取出酶標(biāo)板，設(shè)空白孔，按照次第對(duì)應(yīng)別離參加100μl的規(guī)范品于空白微孔中（空白孔視為0號(hào)規(guī)范品，用醫(yī)用蒸餾水代替）；
2、別離符號(hào)樣品編號(hào)，參加100μl的稀釋樣品于空白微孔中（不一樣的樣本選用不一樣的吸頭）；
3、將酶標(biāo)板置于37℃溫育30分鐘；
4、將酶標(biāo)板板取出，將其間的液體甩去，每個(gè)孔中悉數(shù)加滿(mǎn)運(yùn)用洗刷液后，當(dāng)即甩去液體;
5、每個(gè)孔中加滿(mǎn)運(yùn)用洗刷液后，細(xì)微振搖酶標(biāo)板30秒后將孔中的運(yùn)用洗刷液甩去，在吸水紙大將酶標(biāo)板拍干；
6、重復(fù)第5個(gè)過(guò)程5次，在吸水紙大將酶標(biāo)板拍干；
7、在規(guī)范品孔和樣品孔中參加100μl的酶標(biāo)巧合溶液；
8、將96孔板置于37℃溫育30分鐘；
9、將酶標(biāo)板取出，將其間的液體甩去，每個(gè)孔中悉數(shù)加滿(mǎn)運(yùn)用洗刷液后，當(dāng)即甩去液體；
10、每個(gè)孔中再次加滿(mǎn)洗刷運(yùn)用液后，室溫細(xì)微振搖酶標(biāo)板30秒后將孔中的運(yùn)用洗刷液甩去，在吸水紙大將酶標(biāo)板拍干；
11、重復(fù)第5個(gè)過(guò)程5次，在吸水紙大將酶標(biāo)板拍干；
12、在每個(gè)孔中參加底物A 50μl后當(dāng)即參加底物B 50μl。悄悄振動(dòng)混勻。（A液、B液選用不一樣的吸頭加樣）；
13、將酶標(biāo)板置于37℃避光溫育反響15分鐘；
14、每個(gè)微孔中參加50μl的停止液，悄悄振動(dòng)混勻；
15、在酶標(biāo)儀上，450nm處測(cè)定OD; 顯色后，15分鐘內(nèi)進(jìn)行測(cè)定；
16、根據(jù)制備的規(guī)范曲線，核算樣本含量。
ELISA試劑盒留意事項(xiàng)：
1、此試劑為體外檢查試劑，效期內(nèi)運(yùn)用，試劑應(yīng)視為感染物，不一樣總批號(hào)的試劑不能混用。
2、運(yùn)用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出。室溫放置zui少30分鐘，
3、濃縮洗刷液呈現(xiàn)結(jié)晶后，請(qǐng)于37℃孵育15分鐘。
4、濃縮樣品稀釋液呈現(xiàn)結(jié)晶后，請(qǐng)于37℃孵育15分鐘
5、若24小時(shí)內(nèi)進(jìn)行試驗(yàn)，標(biāo)本可存放于2～8℃。不需及時(shí)試驗(yàn)，標(biāo)本-20℃保留，防止重復(fù)凍融。
6、在重復(fù)清洗微孔板，并扣干微孔中的剩余液體，否則將降低度，形成吸光度偏離的假像。
7、加樣結(jié)束后，應(yīng)留意細(xì)微搖動(dòng)微孔反響條，以便使孔中的液體充分混勻。
8、試劑盒保留于2～8℃，請(qǐng)勿冷凍，有效期請(qǐng)見(jiàn)盒內(nèi)標(biāo)明。
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