ELISA試劑盒每一盒ELISA試劑盒里面都有一份對(duì)應(yīng)的說(shuō)明書(shū)，而每一份說(shuō)明書(shū)里都會(huì)有寫(xiě)樣本和稀釋液的稀釋比例，為什么樣本都需要稀釋呢?今天的文章中，將為您分析：為何ELISA實(shí)驗(yàn)血清樣本都需要稀釋?
在ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)血清為什么要稀釋?zhuān)坑袃蓚€(gè)原因：
1）競(jìng)爭(zhēng)抑制比較明顯，應(yīng)稀釋競(jìng)爭(zhēng)物；
2）以降低非特異性反應(yīng)，使特異性的抗原抗體反應(yīng)充分體現(xiàn)出來(lái)。
血清稀釋用普通的PBS即可，可加1％的BSA，能有效降低ELISA本底，當(dāng)然如果你嫌麻煩我覺(jué)得用生理鹽水替代PBS關(guān)系也不大。不管你是用直接競(jìng)爭(zhēng)還是間接競(jìng)爭(zhēng)，血清的稀釋倍數(shù)肯定要事先確定，但也不用一點(diǎn)點(diǎn)，你做一個(gè)預(yù)試驗(yàn)即可，選擇OD在1.0左右的稀釋倍數(shù)，即你的競(jìng)爭(zhēng)ELISA中陰性孔OD在1.0，這樣作出來(lái)的曲線比較敏感。
ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)稀釋血清的步驟：
先把蛋白稀釋一定的倍數(shù)，比如說(shuō)10倍、20倍稀釋?zhuān)ㄟ@樣可以大體確定一個(gè)參數(shù)），將抗原進(jìn)行一系列稀釋包被微量反應(yīng)板，再用一定稀釋度的陽(yáng)性參考血清和陰性參考血清進(jìn)行孵育后洗滌，再加酶結(jié)合物進(jìn)行反應(yīng)，經(jīng)孵育洗滌后，加底物溶液顯色，終止反應(yīng)后分別測(cè)定O.D值，選擇O.D值≥1.0的那個(gè)抗原稀釋度為zui適包被濃度。一般總是要選擇那個(gè)O.D值稍大于1.0，而不選擇小于1.0的抗原濃度。陰性參考血清O.D值要求<0.1-0.2。也就是要求陽(yáng)性參考血清和陰性參考血清的O.D值有明顯差別。
ELISA試劑盒具有完善的實(shí)驗(yàn)技術(shù)開(kāi)發(fā)平臺(tái)，成熟的抗原、抗體研發(fā)系統(tǒng)，熟練掌握各種酶聯(lián)技術(shù)，結(jié)合公司的研發(fā)團(tuán)隊(duì)，可以有效的保證公司產(chǎn)品強(qiáng)的穩(wěn)定性和高的準(zhǔn)確性，同時(shí)又具有zui有競(jìng)爭(zhēng)力的價(jià)格。 公司目前可以提供生化試劑、分子生物學(xué)試劑及試劑盒，各種抗體及免疫學(xué)試劑盒、實(shí)驗(yàn)耗材等多門(mén)類(lèi)上萬(wàn)種產(chǎn)品，產(chǎn)品涉及分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)等生命科學(xué)的各個(gè)領(lǐng)域。
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