ELISA試劑盒在液相色譜中，可供挑選的活動(dòng)相的規(guī)模較寬，且還可組成多元溶劑體系與不同配比，在固定相斷定后，活動(dòng)相的種類(lèi)、配比、ph值及添加劑等能明顯影響別離作用，因此HPLC中活動(dòng)相的挑選至關(guān)重要。
（1）液-固吸附色譜的活動(dòng)相：在液-固吸附色譜法中，活動(dòng)相對(duì)別離的影響比較明顯，操控別離挑選性和別離速度主要靠挑選適合的活動(dòng)相來(lái)完成。一般選用二元以上的混合溶劑體系，在初級(jí)性溶劑如烴類(lèi)中，參加是兩極性溶劑如、春蕾等以調(diào)理溶劑體系的極性。
（2）ELISA試劑盒化學(xué)鍵合色譜的活動(dòng)相：可選用固定份額（等度洗脫）或按規(guī)則程序改動(dòng)份額（梯度洗脫）的溶劑組成作為活動(dòng)相體系，在液-固吸附色譜法中，一般選用二元以上的混合溶劑體系，在初級(jí)性溶劑如烴類(lèi)中，參加是兩極性溶劑如、醇類(lèi)等以調(diào)理溶劑體系的極性；在液-液分配色譜法中，活動(dòng)相極性較小于固定相極性稱(chēng)為正相色譜；活動(dòng)相極性大于固定相極性稱(chēng)為返現(xiàn)色譜。正相色譜用于別離極性及中等極性的分子型化合物；返現(xiàn)色譜用于別離非極性至中等極性的分子型化合物。在藥物剖析中，檢討色譜運(yùn)用zui廣。在反相色譜法中，因?yàn)楣潭ㄏ鄬?duì)錯(cuò)極性的，所以，活動(dòng)相極性越弱，其洗脫才能越強(qiáng)。典型的反相色譜法是用非極性固定相，常用十八烷基鍵合相（ODS或C18),活動(dòng)相用甲醇-水或乙腈-水。洗脫時(shí)，極性打的組分線流出色譜柱，極性小的組分后流出色譜柱。因?yàn)镃18鍵在水相環(huán)境中不易堅(jiān)持?jǐn)U展?fàn)顩r，故關(guān)于反向色譜體系，活動(dòng)相中有機(jī)溶劑的份額一般不低于5%。不然C18鍵的隨機(jī)彎曲將導(dǎo)致組分保存值改變，造成色譜體系不穩(wěn)定。
反向鍵合相色譜的活動(dòng)相常選用下列三種：1 部分含水溶劑；以水為根底溶劑，在參加一定量可與水互溶的有機(jī)極性調(diào)理劑（如甲醇、乙腈、四氫呋喃），適用于別離中等極性、弱極性藥物、常用甲醇-水、乙腈-水體系。2 非水溶劑：用于別離疏水性物質(zhì)，尤其在柱填料外表鍵合的十八烷基硅膠量較大時(shí)，固定相對(duì)疏水化合物有反常的保存才能，需求有機(jī)溶劑，可在乙腈或甲醇中參加二氯甲烷或四氫呋喃（稱(chēng)非水反相色譜）。3緩沖溶液；適用于可溶于水病可解離的化合物，如蛋白質(zhì)、多肽及弱酸、弱堿類(lèi)成分。緩沖液及其PH值不同會(huì)影響組分的保存值，常用的緩沖液有三乙胺磷酸鹽、磷酸鹽、醋酸鹽溶液，選用的ph值應(yīng)運(yùn)用溶質(zhì)盡可能成為非解離方式，使固定相有較大保存才能（反向離子按捺色譜）。
爭(zhēng)相鍵合相色譜的活動(dòng)相一般選用飽滿烷烴（如正乙烷）中參加異丙醚等極性較大的溶劑作為極性調(diào)理劑，經(jīng)過(guò)調(diào)理劑的濃度來(lái)改動(dòng)溶劑強(qiáng)度，常選用二元以上的混合溶劑體系，可用薄層色譜（TLC）探究適合的活動(dòng)相。
ELISA試劑盒返現(xiàn)離子對(duì)色譜的活動(dòng)相為極性較強(qiáng)的水體系混合溶劑，zui常用的是甲醇-水、乙腈水中參加0.003-0.01mol/L的離子對(duì)試劑，調(diào)理有機(jī)溶劑的份額使組分K值在適合規(guī)模。離子對(duì)試劑的性質(zhì)和濃度、活動(dòng)相的PH值及活動(dòng)相中有機(jī)溶劑的性質(zhì)和份額都會(huì)影響組分的保存值和別離的挑選性。
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