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    上海一研生物科研有限公司


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    技術文章

    進口elisa試劑盒操作流程分析

    閱讀:244發布時間:2017-4-25

    (1)進口elisa試劑盒待測樣品孔中每孔參加待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,參加純細胞裂解液100μl。
    (2)酶標板置4℃,包被過夜。
    (3)洗板:吸干孔內反響液,用洗刷液過洗一遍(將洗刷液注滿板孔后,即甩去),以后將洗刷液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖擺。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗刷3-4次。
    (4)陰性對照孔每孔參加PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔參加1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
    (5)進口elisa試劑盒酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
    (6)洗板,同(4)。
    (7)每孔加1:5000稀釋的HRP-符號的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
    (8)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
    (9)洗板,同(4)。
    (10)每孔加TMB顯色液 100μl,ELISA試劑盒悄悄混勻10s,置37℃暗處反響15-20min。
    (11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4停止反響。
    (12)別離測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終究測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等形成的光攪擾。
    (13)數據處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,核算S/N值。S/N≥2.1為陽性斷定規范進口elisa試劑盒


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