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    雞H9抗原(AIV-H9 Ag)Elisa試劑盒使用方法

    閱讀:307發布時間:2017-3-23

    雞H9抗原(AIV-H9 Ag)Elisa試劑盒操作步驟
    1.elisa試劑盒價格編號:將樣品對應微孔按序編號,每板應設陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1
    孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)
    2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50μl。然后在待測樣品孔先
    加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不
    觸及孔壁,輕輕晃動混勻,
    3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
    4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
    5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此
    重復 5 次,拍干。
    6.加酶:每孔加入酶標試劑 50μl,空白孔除外。
    7.溫育:操作同 3。
    8.洗滌:操作同 5。
    9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
    15 分鐘.
    10. 終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
    11. 測定:以空白空調零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止
    液后 15 分鐘以內進行。

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    雞H9抗原(AIV-H9 Ag)Elisa試劑盒計算和結果判定:
    試驗有效性:陽性對照孔平均值≥1.00; 陰性對照平均值≤0.10
    臨界值(CUT OFF)計算:臨界值=陰性對照孔平均值+0.15
    陰性判定:樣品 OD 值< 臨界值(CUT OFF)者為 H9 抗原(AIV-H9 Ag)陰性
    elisa試劑盒價格陽性判定:樣品 OD 值≥ 臨界值(CUT OFF)者為 H9 抗原(AIV-H9 Ag)陽性


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