干細(xì)胞表面受體配體結(jié)合檢測的新技術(shù)

Tag-lite是SNAP-Tag與HTRF技術(shù)相結(jié)合，用來進行干細(xì)胞表面受體分析的一種技術(shù)。
    SNAP和CLIP是小的融合標(biāo)簽蛋白，可特異地與底物通過芐甲基不可逆共價結(jié)合， 其底物分別為芐甲基鳥嘌呤（BG）和芐甲基胞嘧啶（BC）。由于底物可與各種染料形成衍生物，這樣，通過共價反應(yīng)，染料就標(biāo)記到SANP或CLIP上了。
    SNAP或CLIP可以非常容易地融合到蛋白質(zhì)的N端或C端，所以我們可以構(gòu)建SNAP或CLIP與目標(biāo)蛋白的表達載體。質(zhì)粒轉(zhuǎn)染、融合蛋白表達后，加入標(biāo)記了熒光染料的底物，我們可以得到標(biāo)記了熒光染料的目標(biāo)蛋白。
    在Tag-lite技術(shù)中，用pSNAP或pCLIP與編碼目標(biāo)GPCR的基因構(gòu)建質(zhì)粒，轉(zhuǎn)染入細(xì)胞后，就可表達N端融合了SNAP或CLIP的目標(biāo)GPCR。
    底物（BG或BC）與HTRF熒光染料反應(yīng)形成衍生物，例如與供體（Donor）鋱穴狀化合物（Lumi4®-Tb）形成衍生物，SANP-GPCR或CLIP-GPCR融合蛋白與其反應(yīng)，則Tb被標(biāo)記到GPCR上。加入受體（Acceptor）熒光染料標(biāo)記的配體，可以進行受體配體結(jié)合實驗。根據(jù)實驗?zāi)康模琀TRF的能量受體（Acceptor）與底物形成衍生物，則Acceptor被標(biāo)記到GPCR上，干細(xì)胞可以進行GPCR同源二聚化實驗。除此之外，我們還可以進行GPCR異源二聚化實驗、寡聚化實驗以及內(nèi)源化實驗等細(xì)胞表面受體分析。
鑒別    含量：    進口/國產(chǎn)    棉酚    20mg/支    英文名稱    111517-200001    規(guī)格:
UV法含量測定    含量：    進口/國產(chǎn)    雪膽素甲    20mg/支    英文名稱    111518-200602    規(guī)格:
含量測定    含量：    進口/國產(chǎn)    木犀草素    20mg/支    英文名稱    111520-200504    規(guī)格:
含量測定    含量：    進口/國產(chǎn)    金絲桃苷    20mg/支    英文名稱    111521-201004    規(guī)格:
含量測定    含量：    進口/國產(chǎn)    升麻苷    20mg/支    英文名稱    111522-201008    規(guī)格:
含量測定    含量：    進口/國產(chǎn)    5-O-甲基維斯阿米醇苷    20mg/支    英文名稱    111523-200405    規(guī)格:
含量測定    含量：    進口/國產(chǎn)    木香烴內(nèi)酯    20mg/支    英文名稱    111524-201006    規(guī)格:
含量測定    含量：    進口/國產(chǎn)    去氫木香內(nèi)酯    20mg/支    英文名稱    111525-200706    規(guī)格:
干細(xì)胞