揭示艱難梭菌毒素B入侵人細(xì)胞機(jī)制

在細(xì)胞系一項新的研究中，來自美國哈佛醫(yī)學(xué)院、波士頓兒童醫(yī)院和馬薩諸塞大學(xué)醫(yī)學(xué)院等機(jī)構(gòu)的研究人員鑒定出抵抗新興的威脅生命的胃腸道艱難梭菌（Clostridium difficile）感染的一個關(guān)鍵靶標(biāo)。這項由來自波士頓兒童醫(yī)院的Min Dong博士和Liang Tao博士領(lǐng)導(dǎo)的研究揭示出這種細(xì)菌的Z為強(qiáng)效的毒素如何進(jìn)入細(xì)胞，這是開發(fā)抵抗它的療法的*步。相關(guān)研究結(jié)果于2016年9月28日在線發(fā)表在Nature期刊上，論文標(biāo)題為“Frizzled proteins are colonic epithelial receptors for C. difficile toxin B”。

艱難梭菌導(dǎo)致嚴(yán)重腹瀉和腸道炎癥。它很難被*，已成為因胃腸道疾病而死亡的一個主要原因。艱難梭菌排在美國疾病控制與預(yù)防中心（CDC）列出的緊急耐藥威脅（urgent drug-resistant threats）清單的*，單單在美國一年便導(dǎo)致50萬人感染。在大多數(shù)情形下，這種感染對醫(yī)院、長期護(hù)理機(jī)構(gòu)和長期接受抗生素治療的病人而言是一種威脅。

Dong解釋道，“抗生素清除正常的腸道細(xì)菌，為艱難梭菌在結(jié)腸中定植和生長提供空間。”

Dong、Tao與來自馬薩諸塞大學(xué)醫(yī)學(xué)院的研究人員一起發(fā)現(xiàn)一種關(guān)鍵的艱難梭菌毒素通過一種被稱作Frizzled的 受體進(jìn)入細(xì)胞中---令人諷刺的是，已知這種受體也是協(xié)助維持結(jié)腸健康的信號的進(jìn)入口。

鑒定Frizzled受體

艱難梭菌產(chǎn)生多種毒素，Z為人所知的是毒素A和毒素B。Dong著重關(guān)注毒素B，其中毒素B已被證實即便在毒素A不存在時也能夠獨(dú)自導(dǎo)致疾病。

Dong說，“我們已知道這些毒素靶向和破壞結(jié)腸上皮細(xì)胞，而且它們可能劫持一種細(xì)胞表面蛋白作為它的受體。然而，毒素B的特異性受體一直是個謎。”

Frizzled受體是通過一種新的方法而被鑒定出的。作為Dong實驗室的一名博士后研究員，Tao與來自馬薩諸塞大學(xué)醫(yī)學(xué)院Abraham Brass博士實驗室的研究員Paul Meraner博士合作開展研究。他們首先利用新開發(fā)的CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)開展全基因組篩選，讓體外培養(yǎng)的人細(xì)胞中的基因發(fā)生突變。

Brass說，“Cas9技術(shù)起源自細(xì)菌，因此利用Cas9了解醫(yī)院中Z壞細(xì)菌之一是令人欣慰的。作為胃腸科醫(yī)生，我已觀察到太多的由艱難梭菌導(dǎo)致的困難，因而期待我們戰(zhàn)勝它的那一天。”

如今，Tao和Meraner擁有細(xì)胞培養(yǎng)板，每個細(xì)胞攜帶一種讓一個不同的基因失去功能的突變。Tao說，“我們?nèi)缓髮⒍舅谺加入到這些培養(yǎng)板中，尋找具有抵抗性的細(xì)胞。”

大多數(shù)細(xì)胞都被這種毒素殺死，不過并不是所有的細(xì)胞系都被殺死。在四輪篩選后，研究人員獲得未受到損傷的細(xì)胞群體。他們推論這些細(xì)胞攜帶保護(hù)它們免受這種毒素傷害的突變。但是突變發(fā)生在哪個基因上呢？

Tao說，研究人員利用下一代測序技術(shù)揭示出這些存活下來的細(xì)胞發(fā)生多種突變，“有一種突變就發(fā)生在一種被稱作Frizzled的受體上”。
用途：   用于含量測定/鑒定/藥理實驗等。                             
提取來源：   豆科植物假地蘭(Crotalaria ferruginea Grah.)的全草                             
溶解性：   可溶于乙酸乙酯、丙酮等溶劑。                             
熔點：   179～180℃                             
藥理藥效：   具有一定的殺菌、消炎作用。                             
貯存條件：   4℃冷藏、密封、避光                             
有效期：   2年                             
產(chǎn)品中文名稱：   羅漢果黃素                             
英文名：   Grosvenorine                             
登錄號：   156980-60-8                             
分子式：   C34H42O18                             
分子量：   738.69                             

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