ATCC細胞培養板的常見問題解答

ATCC細胞培養板依底部形狀的不同可分為平底和圓底(U型和V型);培養孔的孔數有6、12、24、48、96、384、1536 孔等;根據材質的不同有Terasaki板和普通細胞培養板。具體選擇時根據培養細胞的類型、所需培養體積及不同的實驗目的而定。

(1)平底和圓底(U型和V型)培養板的區別和選擇：

貼壁細胞一般用平底培養板。懸浮型細胞的培養一般用V型。

U型培養板亦多用于培養懸浮型細胞 。V型培養板有時用做免疫學血凝集的實驗。

不同型狀的板子自然有不同用途。平底的什么類型的細胞都可用﹐但當細胞數目較少﹐如做克隆時﹐就用96孔平底板﹐另外﹐做MTT等實驗時﹐無論貼壁和懸浮細胞﹐一般均用平底板。至于U或V型板﹐一般在某些特殊要求時才使用。如在免疫學方面﹐當做兩種不同淋巴細胞混合培養時﹐需要二者相互接觸以刺激﹐因此﹐一般需要U型板﹐因細胞會由于重力的作用而聚集在一個很小的范圍內。V型板的用途更少﹐一般用于細胞殺傷實驗時﹐為了使效靶細胞緊密接觸﹐常使用V型板﹐但這種試驗也可用U型板替代(加入細胞后﹐低速離心)如果是養細胞的話，通常是選用平底的， 另外要特別注意材質， 標示"Tissue Culture (TC) Treated"就是養細胞用的。

圓底的好像沒聽說過拿來養細胞。 圓底的通常是拿來做分析， 化學反應， 或是保存樣品用的， 因為圓底比較好將液體吸得干凈，如果用平底的就不好吸了。 不過， 如果你是要測吸光值的話， 一定要買平底的才行。大部分細胞培養都用平底培養板，便于鏡下觀測、有明確的底面積、細胞培養液面高度相對一致，還便于MTT檢測。圓底培養板主要用于同位素摻入的實驗，需要用細胞收集儀收集細胞的培養，如“混合淋巴細胞培養”等。

(2)細胞培養常見問題與解答

問：我看到培養板有4、6、12、24、48、96孔幾種規格 ，但不知道到底什么實驗用哪種規格。

答：要根據你具體的實驗要求，流式一般用6孔，MTT一般用96孔，細胞爬片一般用24孔等，要具體根據你實驗來定。

問：請問哪位高手知道Terasaki板是什么培養板，與普通細胞培養板有什么區別?

答：Terasaki plate主要是用于晶體學研究，產品設計便于對晶體的觀察與結構分析。有兩種sitting 和handing drop兩種方法，兩種方法應用產品的外形結構也不同。材料上選擇crystal class polymer ，特殊的材料有利觀察晶體結構。

細胞培養板主要是PS材料。材料是treated sufface。便于ATCC細胞貼壁生長與伸展。當然還有浮游細胞的生長材料，同時還有low binding surface，有關更多實驗材料上的應用與對材料的選擇。

問：我想測吸光度用酶標儀，用多孔細胞培養板行嗎?請問酶標板 多孔細胞培養板有什么區別?

答：用多空細胞培養板測吸光度肯定可以拉，我們經常用它來做樣品的蛋白定量和MTT檢測。

區別：酶標板一般要比細胞培養板貴，細胞板主要做細胞培養，但也可以用來測蛋白濃度;酶標板包括包被板和反應板，一般不能用做細胞培養，它主要做免疫酶聯反應后的蛋白檢測，它需要更高的要求還需要特定的酶標工作液。常用不同培養板的孔底面積及推薦加液量：不同孔板所加培養液的液面都不宜太深，一般在2-3mm范圍，結合不同孔的底面積就可算出各培養孔的適宜加液量。若加液量過多會影響氣體(氧氣)交換，而且在搬動過程中易溢出造成污染。具體所加細胞密度依實驗的目的不同靈活掌握。

(3)細胞培養板的密閉和污染問題

細胞培養板的加樣和操作：細胞培養板在進行細胞操作時同樣遵循嚴格無菌的原則，各項操作要保證規范、科學，不對細胞的生長造成額外的影響。這其中Z常見的問題就是如何保證加樣后細胞的均勻和盡量減少換液對細胞生長狀態的影響。

問：96，24孔培養板或培養皿的蓋子都很松，這樣是方便了透氣，但是細菌、霉菌等污染物會不會也隨著溜進去呢?

答：1.蓋子很松，屬于半開放培養，這樣的目的是透氣(實際上是為了使培養皿外的co2能夠與培養皿充分交換，維持培養基的pH值)。

2.凡事有利必有弊，這樣當然增加了污染的可能性。此外這樣還會使培養皿內的液體蒸發，這對于定量的藥物來說就顯得值得注意了。所以以下二條措施是必須的a培養箱內空氣必須清潔(定期紫外線照，酒精擦洗，盡量少開關培養箱)b培養箱內的濕度必須始終保持為(培養箱內放置無菌蒸餾水的水槽)。

就好像培養皿，也是一個蓋倒扣的容器，也不會污染。主要是因為蓋子“L”型邊緣產生氣流負壓的緣故，灰塵上面才附著有微生物，而氣流攜帶的灰塵是無法通過產生負壓的蓋邊緣的。而透氣作用只是通過空氣的擴散，不會產生氣流，所以只會透氣不會透菌。

我使用24孔板，在其中的某些孔中有操作(在超凈臺內)，而其它孔中還有細胞要培養.我很擔心這樣會污染，不知道要注意什么?大家不知道有什么好的建議。

在超凈臺內如果操作規范的話應該可以的，我想你可以充分利用培養版的蓋子，盡量只暴露要操作的孔，將其它孔用蓋子蓋起來。這是我的一點粗淺的見解，拋磚引玉吧!

使用前綜合考慮一下，充分使用所以的孔;如果只需要使用少數的孔可以只用一邊的，其余用蓋子蓋住，我習慣于先用右側的孔(右手加樣方便)。

其實自己感覺只要注意ATCC細胞無菌操作，一般是不會污染的。操作時用幾塊玻片把板子一側墊高，不要把蓋子全打開，一般沒問題。