研究人員開(kāi)發(fā)出了一種以新的方式照亮細(xì)胞過(guò)程的生物傳感器

一種新型的熒光生物傳感器可以觀察到在活ATCC細(xì)胞中高度特異性位置發(fā)生的酶和細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)活性。
超分辨率技術(shù)如SOFI突破了光學(xué)顯微鏡的衍射極限。但是，它們只能對(duì)細(xì)胞中的靜態(tài)結(jié)構(gòu)進(jìn)行成像，而不是動(dòng)態(tài)生物活性。
他們發(fā)現(xiàn)一種新的生物傳感現(xiàn)象稱(chēng)為FLINC-接觸增加熒光誘導(dǎo)，當(dāng)兩種熒光蛋白緊密接觸時(shí)，熒光波動(dòng)加快。 FRET（(fluorescence resonance energy transfer）和BiFC（bimolecular fluorescence complementation）有機(jī)會(huì)引發(fā)FLINC。但是FRET不能與超分辨率成像兼容，BiFC是一次不可逆的熒光生成過(guò)程，無(wú)法跟蹤動(dòng)態(tài)生物活性。
研究人員開(kāi)發(fā)出了一種以新的方式照亮ATCC細(xì)胞過(guò)程的生物傳感器，可與SOFI的分辨率匹配，達(dá)到約100nm的分辨率。
當(dāng)兩者接近時(shí)，熒光蛋白Dronpa顯著增加另一種蛋白質(zhì)TagRFP-T的熒光波動(dòng)率。該團(tuán)隊(duì)創(chuàng)建了生物傳感器，這些蛋白質(zhì)放置在酶或信號(hào)分子中可以識(shí)別和修飾肽序列的兩端。通常，生物傳感器具有延伸的構(gòu)象，其中兩種蛋白質(zhì)距離很遠(yuǎn)。但是當(dāng)酶修飾肽序列時(shí)，例如，通過(guò)磷酸化-生物傳感器變成緊湊的形狀，這使蛋白質(zhì)接近并打開(kāi)可以成像的FLINC信號(hào)。使用SOFI的生物傳感器在超分辨率下實(shí)現(xiàn)了可視化ATCC細(xì)胞微區(qū)域中的激酶活性。