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    牛腎細胞;MDBK實驗原理

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    牛腎細胞;MDBK接受后處理
    1) 收到細胞后,請檢查是否漏液 ,如果漏液,請拍照片發給我們。
     
     2) 請先在顯微鏡下確認細胞生長 狀態,去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養約2-3h。
     
     3) 棄去T25瓶中的培養基,添加 6ml本公司附帶的*培養基。
     
     4) 如果細胞密度達80%-90%請及 時進行細胞傳代,傳代培養用6ml本公司附帶的*培養基。
     
     5) 接到細胞次日,請檢查細胞是 否污染,若發現污染或疑似污染,請及時與我們取得。
     
    一.貼壁細胞  
    客戶接收到細胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養瓶外部。
    肉眼觀察細胞培養基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張)。
    顯微鏡觀察細胞,當細胞融匯至80%左右(可以傳代的情況下),細胞應該在37度培養箱預溫1-2h后再做處理。如未達到細胞傳代密度,培養瓶應預留一部分培養基繼續培養。
    嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶。
    將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養基培養細胞)。
    用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細胞,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。 
    1000rpm,5min離心,重懸細胞。換新的細胞培養瓶,37℃,5%CO2  培養。

    二.懸浮牛腎細胞;MDBK 
    1. 接收到細胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養瓶外部。
    2. 肉眼觀察細胞培養基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張)。
    3. 嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶。
    4. 將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒)。
    5. 1000rpm,5min離心,重懸細胞。 換新的細胞培養瓶和新鮮培養基,37℃,5%CO2  培養。

    三.2ml小管操作方法。 
    1. 用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)。
    2. 嚴格無菌操作,用吸管吸出管中細胞至6ml*培養基混勻。
    3換新的細胞培養瓶,37℃,5%CO7  培養。
    規格:        ≥98%            Mycophenolate mofetil    *:    霉酚酸酯    
    規格:        ≥97%            Rosmarinic acid    *:    迷迭香酸    
    規格:        ≥98%            Raffinose    *:    棉籽糖            
    規格:        ≥98%            Raffinose    *:    棉子糖  
    牛腎細胞;MDBK          

     

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