牛胚氣管細胞；EBTr （NBL-4）使用說明書

牛胚氣管細胞；EBTr (NBL-4)使用說明書
規(guī)格：25cm2培養(yǎng)瓶的細胞一瓶，密度70%以上 
特點：細胞代數為3-4代左右
包裝：內層無菌自封袋；防壓泡沫盒；說明書
運輸方式：快遞運輸
細胞活力 95％（Viability by Trypan Blue Exclusion） 
細胞檢測 細胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌
培養(yǎng)條件 詳見細胞說明書 
傳代方法 建議1:2-1:3 兩天換液一次 
凍存條件 90%FBS+10%DMSO 
細胞處理：
1）收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現象，若有上述現象發(fā)生請及時和我們。 
2）仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等。 
3）用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落，將細胞置于培養(yǎng)箱內靜置培養(yǎng)過夜，隔天再取出觀察。此時多數細胞均會貼壁，若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力，如果證實細胞活力正常，請將細胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結果顯示細胞無活力，請拍下照片及時和我們，信息確認后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次。
4）建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和公司技術部溝通交流。 
牛胚氣管細胞；EBTr (NBL-4)注意事項:
1）培養(yǎng)瓶有破裂，培養(yǎng)液有漏液：細胞極大可能會污染，所以我們會及時安排幫老師解決。
 
2）細胞漂?。号囵B(yǎng)瓶不開封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)箱。次日觀察，如細胞大部分又貼回瓶底，表明細胞活力正常，剩余漂浮的細胞可以離心去掉，留10ml培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察，細胞生長至匯合度80%，進行消化傳代；如細胞還是不貼壁，將細胞離心收集轉到新培養(yǎng)瓶，原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)，中間注意觀察，我們的技術人員會一直跟蹤指導，直到問題解決。
 
3）對于生長緩慢的貼壁細胞：可采用適當的提高培養(yǎng)基中血清濃度，或隔日換液的方法來保證細胞的狀態(tài)和生長速度。
 
4）對于生長不均的貼壁細胞：在培養(yǎng)過程中若出現細胞分布明顯不均時（即某一區(qū)域細胞已重疊生長，而旁邊則為一塊空白），此時可將細胞進行消化，重新打散，貼壁，加入新培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。
脂肪水解酶    進口、國產    英文名稱:    Lipase(Candida)    含量:    BR，類型F-300，130u/mg
氯化酵素    進口、國產    英文名稱:    CAT    含量:    BR，類型III，25u/mg
脆壁質酶    進口、國產    英文名稱:    Lysozyme(Chinken egg)    含量:    USP級，1：30000
溶葡萄球菌酶    進口、國產    英文名稱:    Lysostaphin    含量:    高純，1：15000
溶菌酶氯化物    進口、國產    英文名稱:    Lysozyme chloride    含量:    高純，1：10000
1,4-β-D-葡聚糖葡糖苷水解酶    進口、國產    英文名稱:    Cellulase(Trichoderma Vride G)    含量:    USP級，1：3000
牛胚氣管細胞；EBTr (NBL-4)