原代細(xì)胞培養(yǎng)液選配重要性

原代細(xì)胞培養(yǎng)液是人工模擬細(xì)胞體內(nèi)生長的生存環(huán)境，對(duì)于細(xì)胞培養(yǎng)起著關(guān)鍵性作用。
   

    1.   選擇培養(yǎng)基沒有一定的標(biāo)準(zhǔn)，某種培養(yǎng)基可以適合多種細(xì)胞，某種細(xì)胞也可以在不同培養(yǎng)液中生長。但是，建立某種細(xì)胞株所用的培養(yǎng)基應(yīng)該是培養(yǎng)這種細(xì)胞的培養(yǎng)基。可以查閱參考文獻(xiàn)，或在購買細(xì)胞株時(shí)咨詢。 

    2.   1640的確是非常便宜的培養(yǎng)基，也很好用。但是，它的緩沖力Z弱，所以有時(shí)會(huì)對(duì)細(xì)胞的生長狀態(tài)有影響，尤其是一些實(shí)驗(yàn)室長期傳代狀態(tài)不好的細(xì)胞。有條件還是用DMEM培養(yǎng)基。   

    3.      一旦在新鮮培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素時(shí)，放入4度冰箱。應(yīng)該在2到3周內(nèi)用完它。因?yàn)椋恍┛股睾脱逯械幕境煞衷诮鈨龊缶烷_始降解。2-3周后就降解完了。 

    4.    培養(yǎng)基的pH值隨著碳酸氫鈉量的增加，呈拋物線增長，當(dāng)碳酸氫鈉加到一定量時(shí)，pH變化越來越小。而培養(yǎng)基的滲透壓值隨著碳酸氫鈉量的增加，呈直線增長，碳酸氫鈉量越大，滲培養(yǎng)基變成了高滲溶液，細(xì)胞會(huì)脫水。     （ATCC 推薦大部分細(xì)胞添加碳酸氫鈉為1.5g/L）

    5.      胎牛 血清必須貯存于–20 ～ -70℃，若存放于4℃，2～3周就降解了。可將1瓶500ml的血清，每次40～45 ml 分裝于無菌50 ml 離心管中。   

    6.  血清的解凍和原代細(xì)胞的解凍正相反：細(xì)胞是越快越好；血清是越慢越好。血清解凍步驟: -20℃或–70℃冰箱拿出來，放到4℃冰箱，放一天，慢慢融化。 

    7.    進(jìn)口的胎牛血清，一般不需要熱滅活，因?yàn)闀?huì)造成沉淀物顯著增多，且會(huì)影響血清的品質(zhì)。這些沉淀物在顯微鏡下觀察，像是“小黑點(diǎn)”，常常誤以為是血清遭受污染。
膽紅素    進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱    Bilirubin    含量：    HPLC≥98%    規(guī)格:    20mg/支
大葉茜草素    進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱    Rubimaillin    含量：    HPLC≥98%    規(guī)格:    20mg/支
斷血流皂苷A    進(jìn)口/國產(chǎn)    英文名稱    Clinodiside A    含量：    HPLC≥98%    規(guī)格:    20mg/支
原代細(xì)胞