無蛋白血濾液的制備

測定血液或其它體液化學成分時，樣品內蛋白質的存在常常干擾測定。因此，需要先做成無蛋白血濾液再行測定。
無蛋白血濾液制備的基本原理是以蛋白質沉淀劑沉淀蛋白，用過濾法或離心法除去沉淀的蛋白。現介紹幾種常用的方法：
1.鎢酸法
原理： 鎢酸鈉與硫酸混合，生成鎢酸：
Na2WO4 + H2SO4 → H2WO4 十Na2SO4
血液中蛋白質在pH 值小于等電點的溶液中可被鎢酸沉淀：沉淀液過濾或離心，上清液即為無色而透明、pH 約等于6 的無蛋白濾液。可供非蛋白氮、血糖、氨基酸、尿素、尿酸及氯化物等項測定使用。
制備方法：
(1）取50ml 錐形瓶1 只，加入蒸餾水7 份；（2）用奧氏吸管吸取抗凝血1 份，擦去管壁外血液，將吸管插入錐形瓶底部，緩緩放出血液。放完血液后，將吸管提高吸取上清液再吹入，反復洗管3 次。充分混合，使紅細胞*溶解；( 3）加入0.333mol/l，硫酸溶液1 份，隨加隨搖，充分混勻，此時血液由鮮紅變成棕色，靜置5-10min ，使其酸化*；(4) 加入10 ％鎢酸鈉1 份，隨加隨搖；(5）放置約5min 后，如振搖亦不再發生泡沫，說明蛋白質已*變性沉淀。用定量濾紙過濾或離心（2,500r/min , 10min) ，即得*澄清無色之無蛋白血濾液。
用此法制得的無蛋白血濾液為10 倍稀釋的血濾液。即每毫升血濾液相當于0.lml全血。
試劑：(1) 10 ％鎢酸鈉溶液（2) 0.333mol/L 硫酸溶液
2.氫氧化鋅法
原理：血液中蛋白質在pH 大于等電點的溶液中可用znZ 十來沉淀。生成的氫氧化鋅本身為膠體可將血中葡萄糖以外的許多還原性物質吸附而沉淀，所以此法所得濾液Z適作血液葡萄糖的測定（因為葡萄糖多是利用它的還原性來定量的）。但測定尿酸和非蛋白氮時含量降低，不宜使用此濾液。
制備方法：(1)取干燥、潔凈的50ml 錐形瓶或大試管1 支，準確加入7 份水；(2）加入混勻的抗凝血1 份，搖勻；(3）加入10 ％硫酸鋅溶液1 份，搖勻；(4）慢慢加入0.5mol / L 氫氧化鈉溶液1 份，邊加邊搖，放置5min ，用定量濾紙過濾或離心（2,500，10min ) ，除去沉淀，便得到*澄清的無蛋白血濾液。此濾液亦為稀釋10 倍之血濾液。
試劑：(l) 10 ％硫酸鋅溶液（2) 0.5mol / L 氫氧化鈉溶液
3.三氯醋酸法
原理：三氯醋酸為一有機強酸，能使蛋白質變性而沉淀。
制備方法：取10 ％三氯醋酸9 份置于錐形瓶或大試管中，加1 份已充分混勻的抗凝血液。加時要不斷搖動，使其均勻。靜置5min ，過濾或離心。即得10 倍稀釋之清明透亮的濾液。