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    防止RNA酶污染的措施

    時(shí)間:2017-3-21閱讀:178
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    1、 所有的玻璃器皿均應(yīng)在使用前于180℃的高溫下干烤6hr或更長(zhǎng)時(shí)間。

    2、 塑料器皿可用0.1% DEPC水浸泡或沖洗(注意:有機(jī)玻璃器具因可被腐蝕,故不能使用)。

    3、 有機(jī)玻璃的電泳槽等,可先用去污劑洗滌,雙蒸水沖洗,乙醇干燥,再浸泡在3% H2O2 室溫10min,然后用0.1% DEPC水沖洗,晾干。

    4、 配制的溶液應(yīng)盡可能的用0.1% DEPC,在37℃處理12hr以上。然后用高壓滅菌除去殘留的DEPC。不能高壓滅菌的試劑,應(yīng)當(dāng)用DEPC處理過的無(wú)菌雙蒸水配制,然后經(jīng)0.22μm濾膜過濾除菌。

    5、 操作人員戴一次性口罩、帽子、手套,實(shí)驗(yàn)過程中手套要勤換。

    6、 設(shè)置RNA操作實(shí)驗(yàn)室,所有器械等應(yīng)為。

    7、 DEPC能與胺和巰基反應(yīng),因而 含Tris和DTT的試劑不能用DEPC處理

    8、 加樣原則是DNAZ后加,其他試劑按照體積大小從大往小的加。如果是同種引物和探針有多管的話只是DNA不同,那么采取的方法是算出總體積后加在一個(gè)管子里面,混合均勻之后再分裝到各個(gè)管子里去,這樣可以有效地避免誤差及污染。

    9、 普通實(shí)驗(yàn)室容易污染,且污染程度很高,與跑電泳還有質(zhì)粒制備提取都在同一個(gè)房間里有比較大的關(guān)系,Z容易造成高濃度污染的就是產(chǎn)物的開蓋和質(zhì)粒的稀釋。因此要格外注意一些。

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