芹菜源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒?原理簡述

芹菜源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒原理簡述如下:

1. TaqMan熒光探針:PCR擴增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針,該探針為一寡核苷酸,兩端分別標記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團。探針完整時,報告基團發射的熒光信號被淬滅基團吸收;PCR擴增時,Taq酶的5'-3'外切酶活性將探針酶切降解,使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,從而熒光監測系統可接收到熒光信號,即每擴增一條DNA鏈,就有一個熒光分子形成,實現了熒光信號的累積與PCR產物形成*同步。而新型TaqMan-MGB探針使該技術既可進行基因定量分析,又可分析基因突變(SNP),有望成為基因診斷和個體化用藥分析的*技術平臺。

2. SYBR熒光染料:在PCR反應體系中,加入過量SYBR熒光染料,SYBR熒光染料非特異性地摻入DNA雙鏈后,發射熒光信號,而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發射任何熒光信號,從而保證熒光信號的增加與PCR產物的增加*同步。SYBR僅與雙鏈DNA進行結合,因此可以通過溶解曲線,確定PCR反應是否特異。

3. 分子信標:是一種在5和3末端自身形成一個8個堿基左右的發夾結構的莖環雙標記寡核苷酸探針,兩端的核酸序列互補配對,導致熒光基團與淬滅基團緊緊靠近,不會產生熒光。PCR產物生成后,退火過程中,分子信標中間部分與特定DNA序列配對,熒光基因與淬滅基因分離產生熒光 。

大鼠主動脈平滑肌細胞

HUVEC, 人臍靜脈內皮細胞

人臍動脈內皮細胞

人臍靜脈平滑肌細胞

人臍動脈平滑肌細胞

人臍帶血單個核細胞

小鼠骨髓間充質干細胞（EGFP標記）

人骨髓間充質干細胞（hMSCs）

人間充質干細胞-脂肪

人間充質干細胞-肝

人間充質干細胞-臍帶

小鼠神經干細胞

小鼠海馬神經膠質細胞（EGFP標記）

小鼠皮層神經膠質細胞（EGFP標記）

小鼠神經干細胞（EGFP標記）

人腦微血管內皮細胞

人腦血管平滑肌細胞

人海馬神經元

人少突膠質細胞

人星形膠質細胞

小鼠成纖維細胞（EGFP標記）

mCF, 小鼠心臟成纖維細胞

MN-c, 小鼠皮質神經元

MN-h, 小鼠海馬神經元

MSC, 小鼠雪旺細胞

MA, 小鼠星形膠質細胞

MLF, 小鼠淋巴成纖維細胞

mRTEC, 小鼠腎小管上皮細胞

CSC, 小鼠心肌細胞

mEPC, 小鼠內皮祖細胞-骨髓

MEF, 小鼠胚胎成纖維細胞

NSC，大鼠神經干細胞

RN-h, 大鼠海馬趾神經元

rEPC，大鼠內皮祖細胞-骨髓

RN-c, 大鼠皮質神經元