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    初級(jí)會(huì)員 | 第10年

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    人正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子免疫組化試劑盒洗滌方法

    時(shí)間:2021/11/11閱讀:313
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    人正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子(RANTES/CCL5)免疫組化試劑盒洗滌方法:

    1. 自動(dòng)洗板機(jī):每孔加入洗滌液350μl,注入與吸出間隔60秒。洗板5次。

    2. 手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,在潔凈的吸水紙上拍干,每孔加洗滌液350μl,浸泡1-2分鐘,吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體,在厚的吸水紙上拍干。洗板5次。

    實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫;試劑或樣品配制時(shí),均需充分混勻,并盡量避免起泡。

    1.加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣時(shí)將樣品加于酶標(biāo)板底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。給酶標(biāo)板覆膜,37℃孵育2小時(shí)。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

    2.棄去液體,甩干,每個(gè)孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分鐘內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜,37℃溫育1小時(shí)。

    3.棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板 3次,每次浸泡1-2分鐘,大約350μl /每孔,甩干并在吸水紙上輕拍將孔內(nèi)液體拍干。

    4.每孔加HRP Conjugate工作液(臨用前15分鐘內(nèi)配制)100μl,加上覆膜,37℃溫育1小時(shí)。

    5.棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,方法同步驟3。

    6.每孔加底物溶液100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光孵育15分鐘左右(根據(jù)實(shí)際顯色情況酌情縮短或延長(zhǎng),但不可超過30分鐘。當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)孔出現(xiàn)明顯梯度時(shí),即可終止)。

    7.每孔加終止液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。

    8.立即用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)測(cè)量各孔的光密度(OD值)。應(yīng)提前打開酶標(biāo)儀電源,預(yù)熱儀器,設(shè)置好檢測(cè)程序。

    9.實(shí)驗(yàn)完畢后將未用完的試劑按規(guī)定的保存溫度放回冰箱保存至有效期結(jié)束。

    phospho-Androgen Receptor (Ser515)磷酸化雄激素受體抗體

    phospho-Androgen Receptor (Ser791)磷酸化雄激素受體抗體

    phospho-Androgen Receptor (Ser94)磷酸化雄激素受體抗體

    phospho-Androgen Receptor (Tyr363)磷酸化雄激素受體抗體

    ANKK1錨定蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白激酶ANKK1抗體

    phospho-alpha Adducin (Thr445)磷酸化內(nèi)收蛋白抗體

    Annexin A11膜粘連蛋白11抗體

    Annexin A13膜粘連蛋白13抗體

    phospho-ACTH (Ser168)磷酸化促腎上腺皮質(zhì)激素ACTH抗體

    phospho-AKT1 (Ser246)磷酸化蛋白激酶AKT1抗體

    phospho-AKT1/3 (Tyr473)磷酸化蛋白激酶B抗體

    phospho-alpha 1 Sodium Potassium ATPase (Tyr260) 磷酸化鈉鉀ATP酶蛋白a1抗體

    phospho-alpha Adducin(Ser436)磷酸化內(nèi)收蛋白a1抗體

    phospho-AMPK alpha 1 (Ser487)磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1抗體

    phospho-AMPK alpha 2 (Ser345)磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α2抗體

    ASAH1酸性神經(jīng)酰胺酶1抗體

    ADRM1粘附調(diào)節(jié)分子1抗體

    Aphrodisin氣味結(jié)合蛋白抗體

    ALDH2乙醛脫氫酶2抗體

    Annexin A10膜粘連蛋白10抗體

    Anterior Gradient 2前梯度同源蛋白2抗體

    ALDH1B1乙醛脫氫酶5抗體

    ALF通用轉(zhuǎn)錄因子IIA樣因子抗體

    ATG4D自噬相關(guān)蛋白4D抗體

    ATG9A自噬相關(guān)蛋白9A抗體

    Aldolase C醛縮酶C抗體

    Aspartate Aminotransferase谷草轉(zhuǎn)氨酶抗體

    ABCG5三磷酸腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G超家族成員5抗體

    ABCG8三磷酸腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G超家族成員8抗體

    ACADL酰基輔酶A脫氫酶長(zhǎng)鏈抗體

    ACADM?;o酶A脫氫酶中鏈抗體

    ACADS?;o酶A脫氫酶短鏈抗體


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