ＡＴＣＣ細(xì)胞活力檢測主要研究方向

ＡＴＣＣ細(xì)胞活力檢測是檢測樣本中健康細(xì)胞的數(shù)目，這在優(yōu)化細(xì)胞培養(yǎng)條件實(shí)驗(yàn)（如未分化細(xì)胞培養(yǎng)、原代細(xì)胞培養(yǎng)等）中是必須的。主要研究方向包括膜損傷檢測、代謝活性檢測、DNA合成檢測等。

1.膜損傷檢測

使用染料對細(xì)胞進(jìn)行染色（臺盼藍(lán)染色法），膜受損細(xì)胞將會染上色，清點(diǎn)未著色的健康細(xì)胞數(shù)目，從而檢測細(xì)胞膜的狀態(tài)。

另一種目前更常用的方法是對細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的LDH酶活性進(jìn)行檢測。Cytotoxicity Det.Kit PLUS（LDH） 是使用ELISA方法在96/384孔板中高通量地定量檢測細(xì)胞毒性。LDH是個(gè)穩(wěn)定的細(xì)胞質(zhì)蛋白，正常情況下在所有細(xì)胞中保持幾乎相同的濃度，因此可通過檢測受損細(xì)胞釋放的LDH，對細(xì)胞毒性/細(xì)胞活性進(jìn)行簡單定量，從而判斷細(xì)胞膜的受損情況。配合使用Cell Proliferation Reagent WST-1能獲得更多細(xì)胞狀態(tài)。

此外，還可通過檢測上清液中的其他酶活方法來檢測細(xì)胞毒性，如堿性磷酸酶、酸性磷酸酶等。

2.代謝活性檢測

通過添加四咪唑鹽到細(xì)胞中可進(jìn)行線粒體內(nèi)酶代謝活性的測定?；罴?xì)胞能將四咪唑鹽（如MTT）轉(zhuǎn)化成藍(lán)紫色結(jié)晶甲（Formazan），可通過分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀檢測，如：通過Cell Growth Determination Kit, MTT based（CGD1）進(jìn)行ＡＴＣＣ細(xì)胞代謝活性的檢測。需要注意的是MTT法形成的Formazan 是水不溶性的，要加有機(jī)溶劑溶解，但在去上清操作時(shí)有可能會帶走小部分的Formazan，故有時(shí)重復(fù)性略差。因此又開發(fā)出很多種水溶性的四咪唑鹽類：如XTT、CCK-8（WST-8）等。

 Phospho-Pin1 (Ser16) 促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子抗體

 phospho-PKA beta (Ser338) 促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子抗體

 Phospho-PKA C (Thr197) 促腎上腺皮質(zhì)激素ACTH(18-39)抗體

 phospho-PKA R2 (Ser96) 促腎上腺皮質(zhì)激素ACTH (7-23)抗體

 phospho-PKA R2 (Tyr116) 促腎上腺皮質(zhì)激素(1-39)抗體

 phospho-PKC (Thr500) 促尿鈉排泄肽前體C抗體

 Phospho-PKC alpha/beta II (Thr638/641) 促卵泡刺激素受體抗體

 phospho-PKC beta 1/2(Thr500) 促卵泡刺激素抗體

 phospho-PKC delta (Thr505) 促進(jìn)凋亡基因抗體
ＡＴＣＣ細(xì)胞