活細胞直接觀察方法

(一)細胞系相差觀察和攝影

1．相差裝置的使用 相差裝置或顯微鏡都是由兩部分組成，相差聚光器和相差接物鏡。在每個相差接物鏡的光學系統中都有一個光環透鏡；在聚光器內有數個可轉換的相位板，一定倍數的接物鏡使用時需與相應的相位板一致。相差觀察時對照明要求嚴格，光軸要對正，視野照明光度需均勻。

2．操作步驟

(1)調好相位板，使聚光器相位板號與接物鏡放大倍數(相位板)相一致。

(2)抽取接目鏡，再更換輔助望遠鏡，移動輔助鏡筒并調整聚光器相位板，使視野中兩個大小一樣的光環必須相互吻合。

(3)細胞系再重新換上原接目鏡，即成相差圖像；當更換不同倍數接物鏡時，需按上述過程重新調節。

3．注意事項

(1)對培養瓶、皿要求：相差顯微鏡觀察要求底物平坦、質地均勻、透光度強；一般玻璃器皿凹凸不平，不適合做相差觀察和攝影，用質地均勻的塑料器皿培養較好。

(2)準備：觀察和攝影前，要擦凈培養瓶表面，切勿殘留污跡而影響透光度。

(3)調光：調整照明光的照明度及光軸，使視野照明均勻。對準光軸是顯微攝影的重要條件，否則不易獲得理想效果。

(4)細胞系在無自控攝像裝置初次拍攝時，應將放大倍數、照明強度和曝光等條件逐一記錄，再做一組不同曝光時間的試驗，顯影后選取組合，作為以后再拍攝時的標準。