實(shí)驗(yàn)中細(xì)胞爬片的免疫熒光操作步驟

1.取出ATCC細(xì)胞爬片放到35mm或60mm用過的細(xì)胞培養(yǎng)皿里，PBS洗三遍。
 注意：有的時候作的細(xì)胞爬片可能比較小，因此夾取的時候要小心，注意 反正面，放在皿里洗比較方便，避免了來回夾取，另外洗的時候加PBS不要太沖，不要細(xì)胞沖下來。洗的時候我都是多加PBS，稍晃一下就倒掉，沒有等5分鐘或10分鐘。
2. 4％冷的多聚甲醛固定20分鐘，PBS洗三遍。
3. 0.2％Triton X－100通透10分鐘，PBS洗三遍。
4. 與二抗相同宿主的血清封閉30分鐘，PBS洗三遍。
5. 一抗4度濕盒內(nèi)過夜，也可37度2小時，感覺前者效果好，PBS洗三遍。
6.二抗室溫2小時（避光），或者37度1半小時，PBS洗三遍。
7.用DAPI染核，然后直接照熒光片。
8.蒸餾水洗掉PBS，甘油封片，指甲油封片子的四周，因?yàn)楦视筒幌髽渲菢訒桑圆挥弥讣子头獾脑挄囊凰俊?br />人成纖維細(xì)胞-新生兒cDNA    英文名稱：    HDF-n cDNA    ATCC細(xì)胞規(guī)格:    20 reactions        
人成纖維細(xì)胞-成人cDNA    英文名稱：    HDF-a cDNA    規(guī)格:    20 reactions        
人生發(fā)基質(zhì)細(xì)胞cDNA    英文名稱：    HHGMC cDNA    規(guī)格:    20 reactions        
      
人淋巴內(nèi)皮細(xì)胞cDNA    英文名稱：    HLEC cDNA    規(guī)格:    20 reactions        
人淋巴成纖維細(xì)胞cDNA    英文名稱：    HLF cDNA    規(guī)格:    20 reactions        
人口腔角質(zhì)細(xì)胞cDNA    英文名稱：    HOK cDNA    規(guī)格:    20 reactions        
人牙齦成纖維細(xì)胞cDNA    英文名稱：    HGF cDNA    規(guī)格:    20 reactions        
人牙周膜成纖維細(xì)胞cDNA    英文名稱：    HPLF cDNA    規(guī)格:    20 reactions        
人食道上皮細(xì)胞cDNA    英文名稱：    HEEpiC cDNA    規(guī)格:    20 reactions        
人食道平滑肌細(xì)胞cDNA    英文名稱：    HESMC cDNA    規(guī)格:    20 reactions        
人腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞cDNA    英文名稱：    HIMEC cDNA    規(guī)格:    20 reactions        
人腸平滑肌細(xì)胞cDNA    英文名稱：    HISMC cDNA    規(guī)格:    20 reactions        
人結(jié)腸平滑肌細(xì)胞cDNA    英文名稱：    HCSMC cDNA    規(guī)格:    20 reactions        
人肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞cDNA    英文名稱：    HPMEC cDNA    規(guī)格:    20 reactions ATCC細(xì)胞