細胞株培養的基本技術

細胞株培養的基本技術
為了減少污染對細胞培養的影響，必須建立細胞凍存庫。當需要做實驗時從主細胞庫中復蘇細胞建立工作細細胞株庫。每一個凍存標本都應明確記錄細胞的性質、代數及有無污染。同時還應建立規范的檢測程序進行菌檢及細胞鑒定。
為了保證培養細胞系的完整性，必須進行詳細的實驗記錄，應包括以下內容:細胞系的種類及來源、有無污染(如細菌，病毒，支原體)、細胞代數和倍增時間、以及選擇性突變。
詳細的記錄有利于對細胞的遺傳及特性在常規傳代培養中因突變、污染及各種原因導致的改變進行分析。經過連續傳代培養的細胞與它較早代數的凍存細胞相比，隨著培養時間的延長，細胞在適應環境的過程中，其生物特性已發生了改變。
培養的細胞株由若干生長速度及活力各異的亞群組成。隨著培養時間的延長生長速，度快及活力高的細胞亞群逐漸占優勢這種選擇性，趨勢會影響整個細胞群的生物特性。應用不同代數的細胞連續進行實驗則結果會發生偏差。建立細胞凍存庫就能避免這種影響通過復蘇相同代數的細胞，人們就能在較為均一的條件下重復實驗。
細胞株培養工作需要清潔，保持良好的環境及規范的操作程序。超凈工作臺是細胞培養中普遍使用的無菌操作裝置，它需要合理的布置及經常性的維護。超凈工作臺的工作原理是驅動經濾菌凈化后的空氣，通過工作臺面形成氣流屏障，從而阻止外界污染物的侵入并使操作過程中產生的飛沫限制在超凈工作臺中。因為操作過程中可能產生有毒的物質，所以采用垂直氣流比水平氣流安全。