當(dāng)前位置:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>原代細(xì)胞>>小鼠原代細(xì)胞>> 原代小鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)前體細(xì)胞
組織來源 | 腦組織 | 貨號 | GOY-01X1396 |
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產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 細(xì)胞形態(tài) | 雙極、多極形 |
生長特性 | 貼壁 | 用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
細(xì)胞簡介:
小鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)前體分離自腦皮層組織;大腦分左右兩個半球,大腦皮質(zhì)(灰質(zhì))覆蓋著每個大腦半球的大部分,它是神經(jīng)元胞體集中的地方。內(nèi)部則是由神經(jīng)纖維或髓鞘構(gòu)成的白質(zhì)。少突膠質(zhì)細(xì)胞分布于中樞神經(jīng)系統(tǒng),在銀浸染標(biāo)本中,少突膠質(zhì)細(xì)胞比星狀膠質(zhì)細(xì)胞小,其突起也較小而少,呈珠狀,故被稱為少突膠質(zhì)細(xì)胞或寡突膠質(zhì)細(xì)胞。少突膠質(zhì)細(xì)胞(oligodendrocyte)是中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)的成髓鞘神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞,其發(fā)育要經(jīng)歷少突膠質(zhì)細(xì)胞祖細(xì)胞、前少突膠質(zhì)細(xì)胞祖細(xì)胞、未成熟和成熟少突膠質(zhì)細(xì)胞等階段。有學(xué)者將少突膠質(zhì)細(xì)胞按其發(fā)育程度和形態(tài)分為三型。但是,細(xì)胞發(fā)育是一個連續(xù)的過程,其形態(tài)、表達(dá)產(chǎn)物和功能的演變沒有嚴(yán)格的界限,因此,其分類是相對的。這三型分別為:Ⅰ型少突膠質(zhì)細(xì)胞又稱前O2A(pre-O2A progenitor cell)。細(xì)胞呈圓形,表面光滑,直徑約3μm,體外混合培養(yǎng)時成簇生長在星形膠質(zhì)表面,具有很強(qiáng)的分裂增殖潛力,表達(dá)神經(jīng)節(jié)苷GM1、波形蛋白和多唾液酸—神經(jīng)粘附分子(polysialic acid-neural cell adhesion molecule,PSA-NCAM)等。Ⅱ型少突膠質(zhì)細(xì)胞胞體常有雙極或三極突起,極少數(shù)為單極突起,直徑約7μm,有一定的分裂增殖能力。體外培養(yǎng)時為雙潛能細(xì)胞,既可分化為少突膠質(zhì)細(xì)胞又可分化為Ⅱ型星形膠質(zhì),故又稱為少突膠質(zhì)細(xì)胞-Ⅱ型星形膠質(zhì)祖細(xì)胞(oligodendrocyte-type-2 astrocyte progenitor cell,O2A)。O2A除表達(dá)GM1和波形蛋白外還表達(dá)神經(jīng)節(jié)苷GD3和GQ(淋巴雜交瘤株A2B5產(chǎn)生GQ的抗體),故常用A2B5抗體標(biāo)記O2A。Ⅲ型少突膠質(zhì)細(xì)胞不再具有分裂增殖能力,為分裂終期細(xì)胞。直徑約10μm。根據(jù)其形成髓鞘的能力,又分為不成熟的和成熟的兩類少突膠質(zhì)細(xì)胞。不成熟的OL胞體常伸出4~5條較粗大突起,表面還殘留有A2B5標(biāo)記物,同時也表達(dá)O1-O4抗原,無形成髓鞘的能力。成熟的少突膠質(zhì)細(xì)胞突起有如蜘蛛網(wǎng),大量表達(dá)半乳糖腦苷脂(galactocerebro side,GC)、蛋白脂蛋白(proteio lipid protein,PLP)、髓鞘堿性蛋白(myelin basic protein,MBP)等,有對軸突髓鞘化的能力。體外培養(yǎng)的少突膠質(zhì)細(xì)胞前體細(xì)胞(簡稱少突膠質(zhì)細(xì)胞前體細(xì)胞)包括前O2A和O2A和未成熟少突膠質(zhì)細(xì)胞,前兩者具有增殖能力。
方法簡介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)采用yi蛋白酶消化、混合細(xì)胞營養(yǎng)缺失培養(yǎng)、搖床振蕩結(jié)合差速貼壁法并通過專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)前體經(jīng)A2B5免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 原代小鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)前體細(xì)胞 | 英文名稱 | Mouse Oligodendrocyte Precursor Cells |
規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 貨號 | GOY-01X1396 |
組織來源 | 腦組織 | 細(xì)胞形態(tài) | 雙極、多極形 |
培養(yǎng)信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml)
培養(yǎng)基 含B-27 Supplement、PDGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2天半量換液1次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 雙極、多極形
傳代特性 不傳代,不增值,存活1-2周
消化液 0.25%yi蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
1) 將5-10d的乳鼠浸泡入75%乙醇中,移入生物安全柜,
2) 從胸部解剖乳鼠,取出雙肺置于預(yù)冷的PBS中,盡可能的除去結(jié)締組織等,
3) 取肺邊緣部分,剪碎,將組織塊移入T25培養(yǎng)瓶中,倒置于細(xì)胞培養(yǎng)箱中,
4) 2h后,培養(yǎng)瓶中注入2 mL內(nèi)皮培養(yǎng)基,小心將培養(yǎng)瓶正置于培養(yǎng)箱,確保組織塊不會飄起來,
5) 每3d換液2mL,待細(xì)胞從組織塊中爬出來后,隔2d換液,待細(xì)胞融合達(dá)到60-70%左右時,去除組織塊,將肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞重新鋪瓶。
1、您收到細(xì)胞后,請按照以下方法進(jìn)行操作:
取出T-25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精擦拭培養(yǎng)瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置4-6小時或過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),然后換用新鮮培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)或進(jìn)行傳代。
2、細(xì)胞傳代:
1)細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時,棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2)添加0.125%消化液約2ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終止消化,再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1500rpm/min,離心5min;
3)棄上清,沉淀細(xì)胞用12ml培養(yǎng)基重懸,然后按1:2比例進(jìn)行分瓶傳代,放入37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4)待細(xì)胞貼壁后,觀察培養(yǎng)結(jié)果,之后進(jìn)行換液培養(yǎng)或傳代。
3、細(xì)胞凍存:
1)細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時,棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2)添加0.125%消化液約2ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,再加入培養(yǎng)液終止消化,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1500rpm/min,離心5min;
3)用適當(dāng)量的凍存液(基礎(chǔ)培養(yǎng)基:FBS:DMSO=7:2:1)重懸細(xì)胞,并放置于凍存管中;
4)先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,然后將其移入-80℃過夜,24h后轉(zhuǎn)入液氮中進(jìn)行長期保存。
4、細(xì)胞復(fù)蘇:
1)從液氮中取出細(xì)胞凍存管(注意:佩戴防爆管面具), 快速將其置入37℃水浴中解凍,直至凍存管中無結(jié)晶,然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁;
2)將凍存管中的細(xì)胞移至15ml無菌離心管中,滴加入培養(yǎng)液5ml混勻細(xì)胞,然后將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至適當(dāng)面積大小的培養(yǎng)皿中;
3)放置于37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4)第二天,換用新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
小鼠骨髓瘤細(xì)胞;Fox-NY | 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;MEF |
野生型人c-kit受體細(xì)胞株;A7d | 禽副黏病毒(1型)探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 |
小鼠原B細(xì)胞株;BaF3 | 禽腺病毒(11型)探針法熒光定量PCR試劑盒 |
小鼠腦瘤細(xì)胞;BC3H1 | 小鵝瘟病毒探針法熒光定量PCR試劑盒 |
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;C3H 10T1/2 2A6 | 禽腺病毒(8b型)探針法熒光定量PCR試劑盒 |
小鼠樹突狀細(xì)胞肉瘤細(xì)胞;DCS | 禽腺病毒(I群)探針法熒光定量PCR試劑盒 |
小鼠乳腺癌細(xì)胞;CCC-Ca761-03 | 禽腺病毒(IV型)探針法熒光定量PCR試劑盒 |
小鼠冠狀動脈平滑肌細(xì)胞 | 雞滑液囊支原體探針法熒光定量PCR試劑盒 |
小鼠肺腺癌細(xì)胞系;LA795 | 鴨黃病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 |
C3H/An小鼠結(jié)締組織細(xì)胞(L929-TK-);LTK- | 榛果源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒 |
小鼠B淋巴細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞;SH2 | 嗜酸乳桿菌NCFM探針法熒光定量PCR試劑盒 |
小鼠B淋巴細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞;SH3 | 乳雙歧桿菌HN019探針法熒光定量PCR試劑盒 |
倉鼠/小鼠雜交瘤細(xì)胞;145-2C11 | 原代小鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)前體細(xì)胞鼠李糖乳桿菌HN001探針法熒光定量PCR試劑盒 |
小鼠T淋巴細(xì)胞;Cl.Ly1+2-/9 | 動物雙歧桿菌Bb-12探針法熒光定量PCR試劑盒 |
口蹄疫病毒A型(FMDV-A)檢測試劑盒(熒光PCR法) | 凝結(jié)芽孢桿菌BC01探針法熒光定量PCR試劑盒 |
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