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    兔原代軟骨細胞專用培養基

    參  考  價:1 - 560 /件
    具體成交價以合同協議為準
    • 型號

    • 品牌

      其他品牌

    • 廠商性質

      經銷商

    • 所在地

      上海市

    更新時間:2025-05-14 08:56:36瀏覽次數:241次

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    細胞培養
    保存條件 -20℃、避光 貨號 GOY-XP3294
    產品規格 100mL /500mL 用途 僅供科研實驗
    兔原代軟骨細胞專用培養基專用培養基公司正在出售的產品:BCPaP人甲狀腺癌細胞專用培養基beas-2b人支氣管上皮細胞專用培養基Bel-7402人肝癌細胞專用培養基Bel-7405人肝癌細胞專用培養基BEWO人胎盤絨毛膜癌細胞專用培養基BJ人皮膚成纖維細胞專用培養基BIU-87人膀胱癌細胞專用培養基BT-474人乳腺導管癌細胞專用培養基BT-549人乳腺導管癌細胞專用培養基BT-B人宮頸癌細胞專用

    兔原代軟骨細胞專用培養基

    產品介紹:

    兔原代軟骨細胞專用培養基 

    由團隊精心優化,經過長期測試,本產品可保持兔原代軟骨細胞最佳的生長狀態。

    本產品中已包含兔原代軟骨細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于兔原代軟骨細胞的培養。

    規格

    100mL/500mL

    保存條件

    -20℃、避光

    貨號

    GOY-XP3294

    用途

    僅供科研研究實驗

    實驗報告:

    兔原代軟骨細胞專用培養基
    一、分離與培養:

    1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大小;

    2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

    3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;

    4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

    5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

    二、免疫熒光鑒定:

    1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

    2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

    3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

    4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

    5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

    6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

    運輸和保存:

    兔原代軟骨細胞專用培養基

    運輸:放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸

    保存方法:按照對應保存條件保存12個月,配置好的培養基2℃~8℃,保存2個月;

    質量控制:

    兔原代軟骨細胞專用培養基

    注意事項:

    兔原代軟骨細胞專用培養基
    1、收到產品請先檢查包裝是否完好,如有破損,漏液、渾濁等現象請及時聯系我們,培養基凍融后,可能會有少量絮狀物析出,不影響產品正常使用。

    2、請仔細閱讀產品說明書,了解產品使用方法、保存方式、有效期等信息,若因操作失誤,保存不當而導致產品出現污染等問題的,責任由客戶自行承擔。

    3、本產品僅能用于科研,培養基中的一些組分對人體有較低的危害性,如有接觸立即用大量清水沖洗即可。

    培養操作:

    兔原代軟骨細胞專用培養基
    1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養基,培養過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。

    2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養。

    1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

    2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。

    3. 按 6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養液后吹勻。

    4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。

    3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;

    1. 細胞凍存時,棄去培養基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數。

    2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據細胞數量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。

    3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

    公司正在出售:
    兔原代軟骨細胞專用培養基



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    小鼠雜交瘤細胞;cAMP

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    原代間充質干細胞無血清細胞添加劑

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    兔原代軟骨細胞專用培養基原代骨骼肌細胞添加劑

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    原代成骨細胞添加劑

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    原代軟骨細胞添加劑

    小鼠雜交瘤細胞;CHK1

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    小鼠雜交瘤細胞;Calcyclin

     


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