諾卡菌通用PCR檢測試劑盒品牌 返回列表頁

組成及試劑配制:
1、諾卡菌通用PCR檢測試劑盒品牌酶標板：一塊（96孔）
2、 標準品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。

樣本采集、存放及運輸：
1、樣本采集：各類型樣本按照常規方法采集；
2、存放：樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h，-70℃以下可長期保存，但應避免反復凍融（多凍融3次）；
3、運輸：采用泡沫箱加冰密封進行運輸。
【標本要求】
人體鼻腔或咽部分泌物:用無菌捻拭子拭取鼻腔或咽部分泌物，將分泌物或咽拭子置入無菌玻璃管（含0.4ml滅菌生理鹽水），用無菌棉球將試管塞緊后，密閉送檢。標本可立即用于檢測，也可保存于-20℃待測。
【檢驗方法】
1.標本、對照品的核酸裂解處理
用商品化（取得醫療器械許可證）的RNA提取試劑盒處理標本，具體操作參見該試劑盒說明書。
或用Trizol法提取，方法如下：取100?l樣品置于1.5ml 離心管中，加入300?l裂解液（Trizol），再加入100， 混勻器上振蕩混勻5sec或顛倒混勻15次； 13000rpm離心15min， 吸取上層液體，加入等體積異丙醇，顛倒混勻室溫靜置10min， 13000rpm離心10min，輕輕倒去上清；加入700?l 75%乙醇，顛倒洗滌，13000rpm離心5min，輕輕倒去上清，倒置于吸水紙上，棄盡液體或4000rpm離心5sec，將管壁上的殘余液體甩到管底部，用微量加樣器盡量吸干液體，加入20?l DEPC-H2O溶解RNA。
2.試劑配制
取n×19?l H7N9核酸熒光PCR檢測混合液與n×1?l RT-PCR酶（n為反應管數）,振蕩混勻數秒, 3000rpm離心數秒。
3.加樣取上述混合液20?l置于PCR管中，然后將樣品核酸提取液、DEPC-H2O、陽性對照品各5?l分別加入PCR管中，蓋好管蓋，立即進行PCR擴增反應。
4. PCR擴增反應管置于定量熒光PCR儀上，推薦循環參數設置：
45℃×10min; 95℃×15min;循環一次，再按95℃×15sec→60℃×60sec，循環45次;單點熒光檢測在60℃，反應體系為25?l。
熒光通道檢測選擇：選用FAM通道。

ADD1 ELISA KitFBXO27蛋白抗體內收蛋白1(ADD1)ELISA試劑盒
ENDOV ELISA KitFBXO4蛋白抗體內切核酸酶V(ENDOV)ELISA試劑盒
ENDOG ELISA Kit成纖維細胞生長因子受體3抗體內切核酸酶G(ENDOG)ELISA試劑盒
LIPG ELISA KitFAM71D蛋白抗體內皮脂肪酶(LIPG)ELISA試劑盒
NOS3 ELISA KitF-box蛋白相關蛋白33抗體內皮型一氧化氮合酶(NOS3)ELISA試劑盒
ESAM ELISA KitFBXL16蛋白抗體內皮細胞粘附分子(ESAM)ELISA試劑盒
ESM1 ELISA KitFBXL20蛋白抗體內皮細胞特異分子1(ESM1)ELISA試劑盒
Tie2 ELISA KitFBXL15蛋白抗體內皮細胞TEK酪氨酸激酶(Tie2)ELISA試劑盒
ECE1 ELISA KitFBXL21蛋白抗體內皮素轉化酶1(ECE1)ELISA試劑盒
ETRB ELISA KitF-box蛋白家族FBXO7抗體內皮素受體B(ETRB)ELISA試劑盒
ETRA ELISA KitF-box蛋白家族FBXO11抗體內皮素受體A(ETRA)ELISA試劑盒
EDN3 ELISA KitF-box蛋白家族FBXO25抗體內皮素3(EDN3)ELISA試劑盒
EDN1 ELISA KitF-box蛋白家族FBXO18抗體內皮素1(EDN1)ELISA試劑盒
ITLN2 ELISA KitFRG2B蛋白抗體內凝集蛋白2(ITLN2)ELISA試劑盒
ITLN1 ELISA KitFAM71A蛋白抗體內凝集蛋白1(ITLN1)ELISA試劑盒
EM2 ELISA KitFAM83F蛋白抗體內嗎啡肽2(EM2)ELISA試劑盒
ENSα ELISA KitFBXL17蛋白抗體內磺肽α(ENSα)ELISA試劑盒
EG-VEGF ELISA KitFCHSD1蛋白抗體內分泌腺來源血管內皮生長因子(EG-VEGF)ELISA試劑盒
ENGASE ELISA KitFBXL5蛋白抗體內β-N-乙酰基氨基葡萄糖苷酶(ENGASE)ELISA試劑盒
BFP ELISA KitFBXL12蛋白抗體腦指蛋白(BFP)ELISA試劑盒
FABP7 ELISA KitFBXL3蛋白抗體腦型脂肪酸結合蛋白(FABP7)ELISA試劑盒
CKB ELISA KitF-box蛋白相關蛋白11抗體腦型肌酸激酶(CKB)ELISA試劑盒
MN1 ELISA KitFGFR1癌基因伴侶蛋白2抗體腦膜瘤基因1(MN1)ELISA試劑盒
BASP1 ELISA Kit成纖維細胞生長因子受體底物2抗體腦富含膜附著信號蛋白1(BASP1)ELISA試劑盒
NEP2 ELISA KitFNBP1L蛋白抗體腦啡肽酶2(NEP2)ELISA試劑盒
NEP ELISA KitGATA結合蛋白2伴侶蛋白抗體腦啡肽酶(NEP)ELISA試劑盒
CDNF ELISA KitCD349抗體腦多巴胺神經營養因子(CDNF)ELISA試劑盒
BRP44L ELISA KitFISH蛋白抗體腦蛋白44樣蛋白(BRP44L)ELISA試劑盒
BRP44 ELISA Kit脂肪酸脫氫酶2抗體腦蛋白44(BRP44)ELISA試劑盒
CFTR ELISA Kit法尼基二磷酸法尼基轉移酶1/鯊烯合成酶抗體囊性纖維化跨膜傳導調節因子(CFTR)ELISA試劑盒
VAChT ELISA Kit叉頭蛋白D3抗體囊泡乙酰膽堿轉運蛋白(VAChT)ELISA試劑盒
VMAT2 ELISA Kit叉頭蛋白B1抗體囊泡單胺轉運蛋白2(VMAT2)ELISA試劑盒
OXR1 ELISA Kit纖維蛋白原β鏈抗體耐氧化性能蛋白1(OXR1)ELISA試劑盒
TOR3A ELISA Kit構成激活過氧化酶活化增生受體γ樣蛋白2抗體耐扭蛋白3A(TOR3A)ELISA試劑盒
TOR2A ELISA Kit成蛋白相關蛋白1抗體耐扭蛋白2A(TOR2A)ELISA試劑盒
TOR1B ELISA Kit腫瘤病毒受體同源蛋白抗體耐扭蛋白1B(TOR1B)ELISA試劑盒
TOR1A ELISA Kit成纖維細胞生長因子11抗體耐扭蛋白1A(TOR1A)ELISA試劑盒
NCCT ELISA KitHSD13蛋白抗體鈉氯協同轉運蛋白(NCCT)ELISA試劑盒
NKCC2 ELISA KitWnt信號受體FZD2蛋白抗體鈉鉀氯協同轉運蛋白2(NKCC2)ELISA試劑盒
NKCC1 ELISA Kit口蹄疫病毒鈉鉀氯協同轉運蛋白1(NKCC1)ELISA試劑盒
NIS ELISA KitF-box蛋白9抗體鈉碘運輸蛋白(NIS)ELISA試劑盒
NHE1 ELISA Kit脂肪酰基輔酶A還原酶1抗體鈉/氫交換因子1(NHE1)ELISA試劑盒
SGLT5 ELISA Kit細胞生長抑制基因39蛋白抗體鈉/葡萄糖協同轉運蛋白5(SGLT5)ELISA試劑盒
SGLT4 ELISA Kit磷酸神經膜抗體鈉/葡萄糖協同轉運蛋白4(SGLT4)ELISA試劑盒
SGLT3 ELISA Kit脆性X相關蛋白1抗體鈉/葡萄糖協同轉運蛋白3(SGLT3)ELISA試劑盒
SGLT2 ELISA KitF-box蛋白家族FBXO31抗體鈉/葡萄糖協同轉運蛋白2(SGLT2)ELISA試劑盒

反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現非特異條帶。ATGC隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數第二個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量產生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。