磷脂酶D(PLD)可見(jiàn)分光光度法檢測(cè)試劑盒 返回列表頁(yè)

商品屬性：

商品介紹：

測(cè)定意義

磷脂酶D（EC3.1.4.4）即磷脂酰水解酶，是催化磷酸二酯鍵水解和堿基交換反應(yīng)的一類酶的總稱，廣泛存在于高等動(dòng)植物和細(xì)菌等多種生物體中，具有參與細(xì)胞脂質(zhì)代謝、信號(hào)傳導(dǎo)、生物膜形成的抗逆境脅等生理功能。

測(cè)定原理

磷脂酶D催化水解磷脂酰末端的磷脂酰二酯鍵生成磷脂酸和，在氧化酶催化作用下生成甜菜堿和過(guò)氧化氫，過(guò)氧化氫在過(guò)氧化氫酶的作用下將4-氨基林和重蒸酚氧化成粉紅色物質(zhì)，在500nm處有特征吸收峰。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器

天平、研缽、超速冷凍離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)、1 mL玻璃比色皿、恒溫水浴鍋，無(wú)水乙醇。

實(shí)驗(yàn)方法學(xué)：

選擇抗凝的注意點(diǎn)：

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后

用于測(cè)定。

0.5mm四氟板 0.5mm厚度2,2'-硫代二乙酸 98%Anti-HLA-DR/FITC  熒光素標(biāo)記HLA-DR抗原抗體IgG

，99.0%  4,4'-二甲苯亞砜  97%Anti-HLA-E/FITC  熒光素標(biāo)記人類白抗原EIgG

碳酸錳 99.95% metals basis基硫 99%Anti-HLA-G/FITC  熒光素標(biāo)記人類白抗原G/組織相容性白抗原G抗體IgG

碳酸錳 CP，Mn >44%對(duì)甲苯硫酚 99%Anti-HMGA1/FITC  熒光素標(biāo)記高遷移率族蛋白A1抗體IgG

硝酸錳溶液 CP，50 wt. % in H2O愈創(chuàng)木油 Anti-HMGA2/FITC  熒光素標(biāo)記高遷移率族蛋白A2抗體IgG

,四水 AR,99.0%愈創(chuàng)木酚  >99.0%(GC)Anti-HMGB1/FITC  熒光素標(biāo)記高遷移率族蛋白B1抗體IgG

,四水 昆蟲(chóng)培養(yǎng)級(jí)，≥99% 98%Anti-HMGB4/FITC  熒光素標(biāo)記高遷移率族蛋白B4抗體IgG

苯并咪唑 AR,98.5% 98%Anti-HNF-1 Alpha/FITC  熒光素標(biāo)記肝核因子1α抗體IgG

磷脂酶D(PLD)可見(jiàn)分光光度法檢測(cè)試劑盒氧化鍺 99.99% metals basis,200目Anti-CK16/FITC  熒光素標(biāo)記角蛋白16抗體IgG雞趨化因子C-C-元配體14(CCL14)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

硫銅，五水 ACS，98.0-102.0%Anti-CK17/FITC  熒光素標(biāo)記角蛋白17抗體IgG雞過(guò)氧化還原2(PRDX2)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

氧化鋇 AR,97.0% Anti-Phospho-Cytokeratin 17 (Ser44) /FITC  熒光素標(biāo)記化角蛋白17抗體IgG雞內(nèi)皮素受體B(ETRB)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

氧化鋇 99.5%Anti-CK18/FITC  熒光素標(biāo)記角蛋白18抗體IgG雞脂酰肌蛋白聚糖3(GPC3)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

氧化鋇 SPAnti-CK18(C-term) /FITC  熒光素標(biāo)記角蛋白18抗體（C端）IgG雞核孔蛋白85kda(NUP85)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

氧化鋇 99.95% metals basisAnti-CK18/FITC  熒光素標(biāo)記角蛋白18抗體IgG雞脂D2(PLD2)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

鋇 99.9% metals basisAnti-CK19/FITC  熒光素標(biāo)記角蛋白19抗體IgG雞神經(jīng)保護(hù)因子(CVNPF)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒  

水質(zhì)鋇標(biāo)樣 濃度范圍:0.834(mg/L)，分析標(biāo)準(zhǔn)品Anti-CK19/Gold  膠體金離子標(biāo)記角蛋白19抗體IgG雞質(zhì)金屬蛋白17(MMP-17)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

鋇 99%Anti-CK19/FITC  熒光素標(biāo)記角蛋白19抗體IgG雞胃泌素釋放肽前體(ProGRP)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

硫鈰,四水 AR，98%Anti-CK19/RBITC  紅色熒光素羅丹明標(biāo)記角蛋白19抗體IgG雞紅生成素受體(EPOR)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

硝鈰，六水  99.95% metals basisAnti-CK20/FITC  熒光素標(biāo)記角蛋白20抗體IgG雞線粒體乙脫氫(ALDM)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

醋鈰 99.9% metals basisAnti-CK34 BetaE12/FITC  熒光素標(biāo)記高分子量角蛋白CK34βE12抗體IgG雞神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子4(NT-4)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

硝鉺，五水 99.9% metals basisAnti-CK-HMW/FITC  熒光素標(biāo)記高分子量角蛋白抗體IgG雞成纖維生長(zhǎng)因子受體4(FGFR4)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

硫鉺(III)八水化合物 99.9% metals basisAnti-CKMT2/FITC  熒光素標(biāo)記肌激2抗體IgG雞載脂蛋白B(ApoB)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

硝釓,六水 AR，99%Anti-CKIP-1/FITC  熒光素標(biāo)記酪蛋白激2相互作用蛋白1抗體IgG雞26S蛋白體(26S-PSM)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒  

操作步驟:

實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量，如樣品濃度過(guò)高時(shí)，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.        棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl（在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4.        每孔加檢測(cè)溶液B工作液（同檢測(cè)A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7.       依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8.       用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度（OD值）。