口腔鱗癌頸淋巴結轉移癌細胞：GNM 返回列表頁

公司細胞現貨供應，質量有保證、*、實驗效果好，我司為您提供免費代測服務，同時提供最新價格、說明書、規格、用途、實驗原理等相關操作說明。

商品介紹：

使用方法：

收到細胞后，請按照以下方法進行操作。

1. 取出25cm2培養瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩定細胞狀態。

2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。

3. 細胞傳代

1) 吸出25cm2培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次；

2) 添加0.125%消化液約1mL至培養瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入*培養液終止消化；

3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的*培養基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養箱中培養；

4) 待細胞*貼壁后，培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養基。

培養操作：

1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養基，培養過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養。

1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；

1. 細胞凍存時，棄去培養基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養基終止消化，可使用血球計數板計數。

2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據細胞數量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍 存管做好標識。

3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

細胞培養操作規程：

一．培養基及培養凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。

2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

大鼠 S100A11 基因全長ORF克隆

大鼠 IL24 基因全長ORF克隆

大鼠 IL22 基因全長ORF克隆

大鼠 IL17F 基因全長ORF克隆

大鼠 IL17A 基因全長ORF克隆

大鼠 IL13 基因全長ORF克隆

大鼠 IL9 基因全長ORF克隆

大鼠 IL5 基因全長ORF克隆

大鼠 SLC10A2 基因全長ORF克隆

大鼠 ITGB7 基因全長ORF克隆

口腔鱗癌頸淋巴結轉移癌細胞：GNM phospho-c-Jun(Ser243)  磷酸化原基因c-Jun抗體 規格: 0.1ml

ANKRD22  錨蛋白重復結構域蛋白22抗體 規格: 0.2ml

phospho-P53(Ser392)  磷酸化瘤抑制基因P53抗體 規格: 0.1mlPSMD8  蛋白調解因子8抗體 規格: 0.2ml

Rabbit Anti-Biotin/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488標記的兔抗抗體IgG 規格: 0.1mlPhospho-Paxillin(Tyr88)  磷酸化樁蛋白Paxillin抗體 規格: 0.1ml

Neuropilin-2  神經纖毛蛋白-2抗體 規格: 0.1ml

beta Adaptin/AP2  銜接蛋白β抗體 規格: 0.1ml

雙料乳糖蛋白胨培養液（含小倒管） Double Lactose Peptone Broth 10ml*20支/包

60µL 驢抗山羊IgG，辣根過氧化物標記 Donkey Anti-Goat IgG,HRP Conjugate -20℃保存

2 ug pLVX-Tet-On-Advance pLVX-Tet-On-Advance 低溫運輸，-20℃保存

鈉溶液（12mg） Sodium sulfadiazine 1ml*5

FAM59A  FAM59A蛋白抗體 規格: 0.2ml

250mL Acetate Buffer（乙酸緩沖液），1M,pH5.5   Acetate Buffer，1M,pH5.5   常溫保存