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    當前位置:上海谷研實業有限公司>>科研細胞>>原代紅胞>> 小鼠腦靜脈血管內皮細胞

    小鼠腦靜脈血管內皮細胞

    參  考  價面議
    具體成交價以合同協議為準

    產品型號

    品       牌其他品牌

    廠商性質經銷商

    所  在  地上海市

    更新時間:2022-05-19 09:15:12瀏覽次數:199次

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    科研細胞
    原代細胞
    細胞培養
    貨號 GOY-01X1018
    小鼠腦靜脈血管內皮細胞公司正在出售的產品:110642-44-9朝藿定C 規格: HPLC≥98%;20mg
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    艾葉對照藥材 規格: 1g
    17680-84-1高車前

    細胞培養操作規程:

    一.培養基及培養凍存條件準備:

    1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。

    2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。

    3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。

    二.細胞處理:

    1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

    2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

    公司細胞現貨供應,質量有保證、*、實驗效果好,我司為您提供免費代測服務,同時提供最新價格、說明書、規格、用途、實驗原理等相關操作說明。

    產品名稱

    小鼠腦靜脈血管內皮細胞

    規格

    5×10?Cells/T25培養瓶

    分類

    原代細胞

    貨號

    GOY-01X1018

    商品介紹:

    名稱 小鼠腦靜脈血管內皮細胞

    2.組織來源:腦靜脈組織

    3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶

    4.細胞簡介:

    小鼠腦靜脈血管內皮細胞分離自腦靜脈組織;與腦動脈相比,腦靜脈管壁較薄。與身體其他部位的靜脈不同,腦靜脈管壁中沒有靜脈瓣,靜脈血的回流依賴高位的勢能。腦靜脈血的回流路徑可以歸納為:大部腦靜脈血經腦深部靜脈和腦血竇流入頸內靜脈醫|學教育網搜集整理;小部腦靜脈血經眼部翼狀靜脈叢,進入靜脈導血管再到頭皮,最后流入椎管中的椎旁靜脈系統。腦靜脈系統有大量交通枝靜脈叢,即使兩側頸內靜脈都被阻塞,大腦靜脈血仍可經椎靜脈和頸外靜脈系統完成其回流。腦靜脈血管內皮細胞的主要功能是維持血管內外的動態平衡,合成和分泌細胞因子和介質參與免疫反應,維持凝血和纖溶的動態平衡。

    5.方法簡介:

    ()實驗室分離的小鼠腦靜脈血管內皮細胞采用-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法、并通過內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

    6.質量檢測:

    ()實驗室分離的小鼠腦靜脈血管內皮細胞CD31免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

    7.培養信息:

    包被條件PLL0.1mg/ml),明膠(0.1%

    培養基含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

    產品貨號CM-M102

    換液頻率每2-3天換液一次

    生長特性貼壁

    細胞形態內皮細胞樣

    傳代特性可傳2-3

    消化液0.25%

    培養條件氣相:空氣,95%CO25%

    使用方法:

    收到細胞后,請按照以下方法進行操作。

    1. 取出25cm2培養瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩定細胞狀態。

    2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。

    3. 細胞傳代

    1) 吸出25cm2培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次;

    2) 添加0.125%消化液約1mL至培養瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養液終止消化;

    3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代,然后補充新鮮的*培養基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中培養;

    4) 待細胞*貼壁后,培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養基。

     

    培養操作:

    1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養基,培養過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。

    2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養。

    1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

    2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。

    3. 按 6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養液后吹勻。

    4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。

    3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;

    1. 細胞凍存時,棄去培養基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數。

    2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據細胞數量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。

    3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
    圖片13.jpg

    對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

    方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

    50次 玻璃珠法柱式真菌DNAout Glassbeads Column Fungal DNAOUT 常溫 0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Serine protease hepsin

    2 ug pET-21b(+) pET-21b(+) 低溫運輸,-20℃保存 0.625-40 ng/mL ELISA Kit for Human Desert hedgehog protein

    1 管 MDS 42recA trfA大腸桿菌   62.5-4000 nmol/L 人糖蛋

    小鼠腦靜脈血管內皮細胞Rabbit Anti-Bov IgG/APC  APC標記的兔抗牛IgG  規格: 0.1ml

    FRG2B  FRG2B蛋白抗體 規格: 0.2ml

    Bub3  有絲分裂蛋白BUB3抗體 規格: 0.1ml

    Donkey Anti-Goat IgG/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350標記的驢抗羊IgG 規格: 0.1ml

    GJC2/Connexin 47  間隙連接蛋白47抗體 規格: 0.2ml

    WPM培養基 WPM Medium 250g

    5g 尿苷 Uridine 室溫干燥保存

    100mL TE Buffer,100X,pH7.6 TE Buffer,100X,pH7.6 常溫保存

    5次 97孔板PCR片段純化回收試劑盒(離心法) 96 Microwell Plate PCR Clean-Up Kit 常溫

    EPB42/protein 4.2  紅細胞膜蛋白4.2抗體 規格: 0.2mlET-1  內皮素-1抗體 規格: 0.2ml

    1個 陶瓷研缽 (直徑60 mm)  常溫

    10mL Sephacryl S-400基質 Sephacryl S-400 4℃保存

     


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