大孢珊瑚球菌 返回列表頁

保存方法：

傳代保存法：培養(yǎng)基的濃度不宜過高，營養(yǎng)成分不宜過于豐富，尤其是碳水化合物的濃度應(yīng)在可能的范圍內(nèi)盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于最適生長溫度為好。若為產(chǎn)酸菌種，則應(yīng)在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣 [3] 。

液體石蠟覆蓋保存法：該法較前一種方法保存菌種的時間更長，適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧細菌等的保存。

懸液保存法：

① 蒸餾水保存法：適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌，將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數(shù)年。本法應(yīng)注意避免水分的蒸發(fā)。

② 糖液保存法：適用于酵母菌，如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中，然后于冷暗處保存，可長達10年。除此之外，也可使用緩沖液或食鹽水等進行保存。

載體保存法：①土壤保存法；②砂土保存法；③硅膠保存法；④磁珠保存法；⑤麩皮保存法；⑥紙片(濾紙)保存法。

常用的冷凍保存法：

① 低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃)：低溫冷凍保存時使用螺旋口試管較為方便，也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時菌液加量不宜過多，有些可添加保護劑。此外，也可用φ5mm的玻璃珠來吸附菌液，然后把玻璃珠置于塑料容器內(nèi)，再放入低溫冰箱內(nèi)進行保存的。

② 干冰保存法(-70℃左右)：即將菌種管插入干冰內(nèi)，再置于冰箱內(nèi)進行冷凍保存。

③ 液氮保存法(-196℃)：是適用范圍*的微生物保存法。

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菌種的培養(yǎng)：

1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長基質(zhì)組成的繁殖材料。菌種分為母種（一級種）、原種（二級種）和栽培種（三級種）三級。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種，其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復(fù)篩。

2、挑選具有某種能力的有用菌種，也稱種子制備，是指菌種在一定條件下，經(jīng)過擴大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質(zhì)量的純生產(chǎn)菌種的制備過程。以作接入發(fā)酵罐中進一步擴大菌體量及合成產(chǎn)物之用。

3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備 菌種制備。

4、保存在沙土管或冷凍管中的生產(chǎn)菌種，用無菌手續(xù)挑取少許，接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上，在25℃（或較高溫度）下培養(yǎng)5～7天（或較長時間。所得孢子還需進一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子（對于霉菌類孢子制備，多數(shù)采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基）。

5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液，接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上，于25～28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在生產(chǎn)上延續(xù)使用半年左右。

6、如果有些生產(chǎn)菌種不產(chǎn)孢子，如赤霉素產(chǎn)生菌或產(chǎn)孢子不多的，則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體，作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應(yīng)是易于被菌體利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米漿），及無機鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應(yīng)生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯，無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%～20%。

微生物菌種的培養(yǎng)：

⒈ 孢子制備

⑴ 孢子的制備

一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營養(yǎng)成分，如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1％，氮源不超過0.5％)，碳源豐富容易造成生理酸性的營養(yǎng)環(huán)境，不利于形成，氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下，干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃，少數(shù)為37 ℃，培養(yǎng)時間為5～14天。

⑵ 霉菌孢子的制備　

霉菌的孢子培養(yǎng)，一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖，而且這類培養(yǎng)基的表面積較大，可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25～28 ℃，培養(yǎng)時間為4～14天。

⒉ 種子制備

⑴ 搖瓶種子制備　

搖瓶種子進罐，常采用母瓶、子瓶兩級培養(yǎng)，有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*，并易被菌體分解利用，氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃，子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高，更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。

⑵ 種子罐種子制備　

種子罐種子制備的工藝過程，因菌種不同而異，一般可分為一級種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中，經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲，這樣的種子稱為一級種子，把一級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱為二級發(fā)酵。如果將一級種子接入體積較大的種子罐內(nèi)，經(jīng)過培養(yǎng)形成更多的菌絲，這樣制備的種子稱為二級種子，將二級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱為三級發(fā)酵。同樣道理，使用三級種子的發(fā)酵，稱為四級發(fā)酵。

Bacillus anthracis5核苷酸檢測試劑盒

Bacillus barbaricus肌半乳糖苷合成檢測試劑盒

Paenibacillus pabuliα-葡萄糖苷檢測試劑盒

Bacillus megaterium番茄叢矮病檢測試劑盒

Sporosarcina macmurdoensis谷氨酰半胱連接檢測試劑盒

Sporosarcina macmurdoensisG蛋白信號調(diào)節(jié)蛋白4檢測試劑盒

Bacillus humiG蛋白偶聯(lián)雌受體1檢測試劑盒

Citricoccus muralisD酸檢測試劑盒

大孢珊瑚球菌三丁氧化錫 96%PLC(Human Phospholipase C) ELISA Kit  人酯C兔多效生長因子(PTN)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

D-(-)-阿拉伯糖 98%Tyk-2(Human tyrosine kinase2) ELISA Kit  人酪氨激2兔延伸蛋白A(EloA)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

六氟酮三水合物 95%ICE(Human Interleukin 1 Beta converting enzyme) ELISA Kit  人白介素1β轉(zhuǎn)換兔組織轉(zhuǎn)谷氨酰(TGM2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

鄰氨酚 98%ILK-1(Human integrin-linked kinase 1) ELISA Kit  人整合素連接激1兔表面活性物質(zhì)關(guān)聯(lián)蛋白J(SPJ)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

2-氨-4-酚 98%CYP21B(Human Cytochrome P450c21/21-hydroxylase) ELISA Kit  人色素P450c21B/21-羥化兔Smad同源物4 (Smad4/MADH4)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

鄰硝對叔丁酚 98%TdT(Human terminal deoxynucleotidyl transferase) ELISA Kit  人末端脫氧核苷轉(zhuǎn)移兔因子受體2(EGFR2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

鄰硝對酚 98%IDO(Human indoleamine 2,3-dioxygenase) ELISA Kit  人2,3-雙加氧兔骨骼肌快肌肌鈣蛋白I(TNNI2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

1,4-萘二 95%PRSS(Human serine protease) ELISA Kit  人絲氨蛋白兔肽酰脯氨酰異構(gòu)/親環(huán)素樣蛋白1(PPIL1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

4,4'-二乙烯二羧 90%Syk(Human spleen tyrosine kinase) ELISA Kit  人脾臟酪氨激兔骨成型蛋白4 (BMP-4)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

4,4'-二乙烯二羧 96%STK(Human serine/threonine protein kinase) ELISA Kit  人絲氨/蘇氨蛋白兔白三烯E4(LTE4)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

噻吩-2，5-二羧 98%IRAK(Human interleukin receptor associated kinase) ELISA Kit  人白介素受體相關(guān)激兔血管內(nèi)皮抑素抗體(ES-Ab)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒  

3-三乙氧硅烷 98%UK(Human urokinase) ELISA Kit  人尿激兔B分化因子(BCDF)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒  

3-二氧硅烷 97%PCK(Human phosphoenolpyruvate carboxykinase) ELISA Kit  人烯式酮羧激兔(SST)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

N,N-二 CP,98%Human trypsin ELISA Kit   人胰蛋白兔腫瘤壞死因子受體超家族成員1B(TNFRSF1B)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

N，N-二乙 ARBACE1(Human Beta-site APP-Cleaving Enzyme 1) ELISA kit  人β位淀粉樣前體蛋白裂解1兔XII B組脂A2(PLA2G12B)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒