大鼠白介素17（IL-17）ELISA試劑盒實驗原理

大鼠白介素17（IL-17）ELISA試劑盒實驗原理
   本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中大鼠白介素17(IL-17)水平。用純化的大鼠白介素17(IL-17)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入白介素17(IL-17)，再與HRP標(biāo)記的白介素17(IL-17)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的白介素17(IL-17)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中大鼠白介素17(IL-17)濃度。

樣本處理及要求
1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。
2. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。
3. 尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
5. 大鼠白介素17（IL-17）ELISA試劑盒組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
Anti-IGFBP-2       規(guī)格:    規(guī)格：     0.2ml    產(chǎn)品名稱:    胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白-2抗體
Anti-IGFBP-5/IBP5       規(guī)格:    規(guī)格：     0.1ml    產(chǎn)品名稱:    胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白-5抗體
Anti-IGF-I      規(guī)格:    規(guī)格：     0.1ml    產(chǎn)品名稱:    胰島素樣生長因子-I抗體
Anti-IGF-II      規(guī)格:    規(guī)格：     0.1ml    產(chǎn)品名稱:    胰島素樣生長因子-II抗體
IGF-IIBP3      規(guī)格:    規(guī)格：     0.2ml    產(chǎn)品名稱:    胰島素樣生長因子2 mRNA 結(jié)合蛋白3抗體
大鼠白介素17（IL-17）ELISA試劑盒