TSZelisa試劑盒操作步驟說明

TSZelisa試劑盒?操作步驟說明
操作步驟
1.標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。240μg/ml 5號標準品 150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
120μg/ml 4號標準品 150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
60μg/ml 3號標準品 150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
30μg/ml 2號標準品 150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
15μg/ml 1號標準品 150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋
2.加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3.配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用
4.加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。
5.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
6.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。
7.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
8.終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。
9.測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。TSZelisa試劑盒? 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。